浸提法测定玉米叶绿素含量的改进VIP免费

玉米科学2007，15(4)：93～95．99JoumalofMaizeSciences文章编号：t005-0906(2007)04—0093一帕浸提法测定玉米叶绿素含量的改进明华。2，胡春胜1，张玉铭1，程一松1(1中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心，石家庄050021；2中国科学酷研究生院，北京100049)摘要：以玉米叶片为试材。研究了8种不同有机溶剂浸提液提取叶绿索的效率及低温冷冻对叶绿紊提取的影响。试验中采用叶绿素仪先预叶片；冷冻一高温快速浸提试验，采用先称取样品，后冷冻方式。结果表明：室温f25℃)下‘，授提法要优于研磨法．混合液浸提叶绿索比单独用丙酮或乙醇浸提快，其中丙酮：乙醇-2：l的浸提液程提速度快而稳，是试验中最佳的叶绿素提取方法。最佳浸提时间在浸提16h时。叶片冷冻处理后，快速授提能够缩短叶绿紊浸提时问。由于受光照、高温的影响．测定值普遍较低。关键词：玉米；叶绿素；浸提；有机溶刺中固分类号：s513文献标识码：AImprovedExtfactionMethodsofChlorophyllfrOmMaizeMINGHual‘HUChun—shen91，ZHANGYu-ming‘，C}玎￡NGYi-son91『1．CenterforA咖ulturalResourcesReseezch,InstituteofGeneticsandIkvelopmentalBiology,CAS,Sh哲／azhuan9050021；2．GraduateUniversityoftheChineseAcademyofSciences，Beijing100049，Chino)Abstract：Theextractionefficieneiesofchlorophyllfrommaizeleavesafterfrozentreatmentwerecomparedoneightdeterminedmethodsusingdifferentorganicsolvents．WeusedSPAD一502beforesampling,weighedupthele8vesbefot}freezing．nmreSuhshowedthatsoakingmethodsweMbetterthanAmanmethodat25℃．ItWaSbettertomeasUl_etheefi％ieneiesofehlorophyllusingmixturesolutionthanusingacemneorethanollonely．Wegotthecollu—siouthatmethodsofacetonemixedwithethanol(2：1)w∞thebestofall，andthebesttime砒16haftersoaking．qlaemethodsoffrozentreatmentbeforesoakingcouldadvancethespeedofchlorophyll，butthenumberdecreasedbecauseofthelightorhi出temperatare．Keywords：Maize；Chlorophyll；Extraction；Organicsolvents对叶绿素的研究一直是人们极其关注的课题。叶绿素含量泓定方法主要有分光光度法和：活体叶绿素仪法两大类，后来又发展了光声光谱法。但是，用手持叶绿素仪或光谱分析仪测得的是色素相对含量指标，并且不同种类植物叶片中的色素指标与实际叶绿索含量之间的关系方程式不同．即不能用一种关系来转换不同植物的色素含量。在日常实验中普遍采用分光光度法，用的较多的是Aman法。Amon法需要把植物材料研磨，经过过滤或离心长，在操收稿日期：2007--01-04；修固日期：2007--04-02基金项目：中国科学院知识创新项目{l【sc)【z—YW-N-037)作者简介：明华(1951一)，男，在读硕士，研究方向：养分循环及其环境效应。Tel：0311．-8581476913473776475E-mnlhminghua05@mmls．目aeas．犯．∞除渣、移液、定容、比色等过程，工作量大，提取时间作过程中误差较大，且易受光氧化的破坏，不适于对田间大量样品的测定和大量叶绿素的提取．并且也不适合大批量样本的应急检测。∞年代初张宪政提出了丙酮乙醇混合液浸挺法，证明利用混合液进行叶绿素浸提的可行性。进一步研究后发现，混合液法比传统Arnon法提取叶绿素效率高，稳定性好。洪法水等发现，丙酮与乙醇在等浓度混合时提取效果最好。但也有研究者认为丙酮与乙酶2：1)混合液浸提叶绿素效果较好。吴志旭、张雅燕对丙酮萃取分光光度法进行了改进，提取时间由原来的8—20h缩短为1．5～2．5h。本试验在前人的基础上，以常规的Amon法作为对照，对研磨法和混合液浸提法进行了研究，探讨叶绿素含量测定方法的优劣及快速、大批量测定叶万方数据玉米科学15卷绿索含量的步骤，为大田玉米大批量叶绿素含量测定提供理论支持。1材料与方法1．1试验材料、仪器、试剂玉米叶片；带有刻度的50mL容量瓶；日本SPAD一502型叶绿素仪；上海第三分析仪器厂生产的721型分光光度计；丙酮、甲醇、乙醇都为分析纯，95％乙醇直接采购。按体积比配制浸提液：80％丙酮；95％乙醇；丙酮：乙醇=1：1；丙酮：乙醇=2：1...