疟原虫血片的制作与染色河北省疾病预防控制中心寄生虫病防治所甄素娟主要内容•厚薄血膜的制作•制作血膜的注意事项•吉氏染色液的配制•血膜的染色•影响染色的因素•病例标本采集•考试内容•考核评分表血片制作薄血膜:借推片将血液薄薄地涂在载玻片上,使每个血细胞平铺
厚血膜:是把较多的血液涂成圆形,血膜中血细胞重叠,原虫较为集中
采血时间•间日疟和三日疟可在发作后任何时间采血,但在发作后6~8小时内最佳;•恶性疟应在发作开始后不久作血检
•患者在开始发作时血检可能查不到疟原虫,应在第二次发作时再作血检,以免漏检
取血部位以耳垂较为合适,也可在手指末端采血,先用75%酒精棉球消毒取血部位(冬季用手捻动耳垂使其充血后再行消毒),待干后,以左手拇指和食指夹住被检者手指尖稍下方或轻轻捻转耳垂边缘,右手持消毒刺针,迅速刺入取血部位1~2毫米深,然后用左手大拇指、食指和右手中指协同挤出血滴
※将玻片分为6等分,第1、2格备贴标签及编号用;厚血膜涂在第3格中央,薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部
※作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个
血膜的位置•薄血膜:取洁净的载玻片2张,1张做载片,以左手拇指,食指夹持载玻片两端,用另一张载玻片(最好为磨口边缘)做推片,用右手大拇指和食指夹持推片侧缘中部用推片一端边缘的中点从取血部分取约1µl的血量(相当于1/4火柴头大小),使血滴与平置的载玻片接触,并形成25~35℃夹角,待血液向两侧扩展约2厘米长度时,均匀而迅速地向左推出约2
5厘米长舌状血膜
(涂片操作)厚血膜用推片的一角,从取血部位刮取4~5µl血量(相当于火柴头大小),使血滴与平置的载玻片接触,再由里向外一个方向旋转,转4~6圈,涂成直径0
8~1厘米大小圆形厚血膜,血膜厚薄均匀,过厚易于脱落,过薄达不到检出率的要求
厚血膜的厚度以一个油镜视野内可见5~10个白细胞为宜
薄血膜厚血膜标记处标准的血涂