实验一马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制一、食用菌菌种种类人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。1)母种(一级菌种):用孢子分离或组织分离等培育的菌丝体称为母种。2)原种(二级菌种):把母种扩大到木屑、棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。3)栽培种(三级菌种):由原种扩大培养成为生产上使用的菌种称为栽培种。4)菌种:实质上就是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。二、食用菌的制种程序组织分离接种→母种(一级)接种→→原种(二级)接种→→栽培种(三级)种菇孢子分离经过这样三级培养,食用菌菌丝数量大大增加。一般1支试管菌种可繁殖4~6瓶原种,每瓶原种又可扩大繁殖60~100瓶栽培种。培养培养母种原种和栽培种三、菌种生产常用的设备和用具1、接种设备⑴接种室⑵接种箱⑶超净工作台超净工作台2、灭菌设备1)手提式:容量小,适于斜面试管及玻璃器皿等;2)立式:容量大,投资大;3)卧式:容量大,投资大;4)家用24或26cm压力锅:母种、原种培养基。Ⅰ高压蒸气灭菌锅优点:省时、省燃料、效果好2)、3)一般在菌种场或研究所应用。三、菌种生产常用的设备和用具灭菌设备Ⅰ高压蒸气灭菌锅2、灭菌设备Ⅱ常压灭菌锅目前农村生产栽培种的必备设备,实际上是一种大型蒸笼式煮灶。底部为铸铁大锅,上部为圆形木桶,桶内装数层供放培养基的格架。桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈,由于锅内温度最高是100℃,所以灭菌时间需维持10~12h,才能达到灭菌效果。三、菌种生产常用的设备和用具⑴培养室⑵生化培养箱3、培养设备三、菌种生产常用的设备和用具4、培养菌种的容器母种:试管,常用规格20×180~200mm,18×180mm等。原种、栽培种菌种瓶:盐水瓶、罐头瓶菌种袋聚丙稀袋聚乙稀袋规格有:12~15×30~35cm,17×35~45cm三、菌种生产常用的设备和用具菌种瓶5、接种工具移植菌种于培养基上的工具称接种工具,主要有以下几种:接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等;三、菌种生产常用的设备和用具⑴70%酒精:一般用于手、种菇表面消毒;⑵0.1%升汞:常用于玻璃器皿、非金属器械及种菇表面消毒;⑶0.1%KMnO4:一般用于用具、器皿消毒;6、常用的消毒药品三、菌种生产常用的设备和用具⑷5%石炭酸:喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等,也可用来苏尔代替;⑸2%来苏尔、新洁尔灭:用法同上;⑹甲醛(福尔马林):用于菇房和接种箱等空气消毒;方法:关闭门窗消毒,自行气化;用量:10ml甲醛+5gKMnO4/立方米。6、常用的消毒药品三、菌种生产常用的设备和用具四、母种生产技术食用菌母种培养基的种类繁多,由于不同营养类型的食用菌对营养物质的要求不同,所以,在培养不同食用菌母种时,应选择适宜该菌种的培养基。母种培养基要求营养丰富、完全、氮源、维生素的比例应高。现将食用菌常用的母种培养基列举如下:(一)母种培养基①马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)马铃薯20g、葡萄糖(或蔗糖)2g、琼脂2g、H2O100mL、pH6.5。适用于一般食用菌母种分离与培养,但草菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。四、母种生产技术②综合马铃薯培养基马铃薯200g、葡萄糖(或蔗糖)20g、KH2PO42g、MgSO40.5g、维生素B110mg、琼脂20g、H2O1000ml、pH自然。适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌种分离、保藏。四、母种生产技术③胡萝卜葡萄糖琼脂培养基胡萝卜200g、葡萄糖(或蔗糖)18~20g、琼脂20g、H2O1000ml、pH自然。四、母种生产技术⑵PDA培养基配制方法马铃薯(去皮、去芽眼)→切成片(玉米大小)→称取20g+70mLH2O→煮沸15-20min→双层纱布过滤→取滤液并补足100mL+琼脂2g+→熔化+葡萄糖2g→分装试管(不要倒到试管壁上)→塞上棉塞→捆扎→灭菌(高压蒸气灭菌15-30min)→制成斜面→检查灭菌效果(即28~30℃培养2~3d)(3)作业(1)每人制5支试管斜面。(2)什么叫食用菌菌种?它又有哪些类型?(3)食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些?(4)写出食用菌的制种程序。(5)常用的消毒药品有哪些?