马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制VIP免费

实验一马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基配制一、食用菌菌种种类人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。1）母种（一级菌种）：用孢子分离或组织分离等培育的菌丝体称为母种。2）原种（二级菌种）：把母种扩大到木屑、棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。3）栽培种（三级菌种）：由原种扩大培养成为生产上使用的菌种称为栽培种。4）菌种：实质上就是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。二、食用菌的制种程序组织分离接种→母种（一级）接种→→原种（二级）接种→→栽培种（三级）种菇孢子分离经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。一般1支试管菌种可繁殖4~6瓶原种，每瓶原种又可扩大繁殖60~100瓶栽培种。培养培养母种原种和栽培种三、菌种生产常用的设备和用具1、接种设备⑴接种室⑵接种箱⑶超净工作台超净工作台2、灭菌设备1）手提式：容量小，适于斜面试管及玻璃器皿等；2）立式：容量大，投资大；3）卧式：容量大，投资大；4）家用24或26cm压力锅：母种、原种培养基。Ⅰ高压蒸气灭菌锅优点：省时、省燃料、效果好2）、3）一般在菌种场或研究所应用。三、菌种生产常用的设备和用具灭菌设备Ⅰ高压蒸气灭菌锅2、灭菌设备Ⅱ常压灭菌锅目前农村生产栽培种的必备设备，实际上是一种大型蒸笼式煮灶。底部为铸铁大锅，上部为圆形木桶，桶内装数层供放培养基的格架。桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈，由于锅内温度最高是100℃，所以灭菌时间需维持10~12h，才能达到灭菌效果。三、菌种生产常用的设备和用具⑴培养室⑵生化培养箱3、培养设备三、菌种生产常用的设备和用具4、培养菌种的容器母种：试管，常用规格20×180~200mm，18×180mm等。原种、栽培种菌种瓶：盐水瓶、罐头瓶菌种袋聚丙稀袋聚乙稀袋规格有：12~15×30~35cm，17×35~45cm三、菌种生产常用的设备和用具菌种瓶5、接种工具移植菌种于培养基上的工具称接种工具，主要有以下几种：接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等；三、菌种生产常用的设备和用具⑴70%酒精：一般用于手、种菇表面消毒；⑵0.1%升汞：常用于玻璃器皿、非金属器械及种菇表面消毒；⑶0.1%KMnO4：一般用于用具、器皿消毒；6、常用的消毒药品三、菌种生产常用的设备和用具⑷5%石炭酸：喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等，也可用来苏尔代替；⑸2%来苏尔、新洁尔灭：用法同上；⑹甲醛（福尔马林）：用于菇房和接种箱等空气消毒；方法：关闭门窗消毒，自行气化；用量：10ml甲醛＋5gKMnO4／立方米。6、常用的消毒药品三、菌种生产常用的设备和用具四、母种生产技术食用菌母种培养基的种类繁多，由于不同营养类型的食用菌对营养物质的要求不同，所以，在培养不同食用菌母种时，应选择适宜该菌种的培养基。母种培养基要求营养丰富、完全、氮源、维生素的比例应高。现将食用菌常用的母种培养基列举如下：（一）母种培养基①马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）马铃薯20g、葡萄糖（或蔗糖）2g、琼脂2g、H2O100mL、pH6.5。适用于一般食用菌母种分离与培养，但草菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。四、母种生产技术②综合马铃薯培养基马铃薯200g、葡萄糖（或蔗糖）20g、KH2PO42g、MgSO40.5g、维生素B110mg、琼脂20g、H2O1000ml、pH自然。适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌种分离、保藏。四、母种生产技术③胡萝卜葡萄糖琼脂培养基胡萝卜200g、葡萄糖（或蔗糖）18~20g、琼脂20g、H2O1000ml、pH自然。四、母种生产技术⑵PDA培养基配制方法马铃薯（去皮、去芽眼）→切成片（玉米大小）→称取20g＋70mLH2O→煮沸15-20min→双层纱布过滤→取滤液并补足100mL＋琼脂2g+→熔化＋葡萄糖2g→分装试管（不要倒到试管壁上）→塞上棉塞→捆扎→灭菌（高压蒸气灭菌15-30min）→制成斜面→检查灭菌效果（即28~30℃培养2~3d）（3）作业（1）每人制5支试管斜面。（2）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？（3）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？（4）写出食用菌的制种程序。（5）常用的消毒药品有哪些？