•单克隆抗体等动物细胞工程常用的技术•动物细胞培养•动物细胞核移植•动物细胞融合是其他动物细胞工程技术的基础。是其他动物细胞工程技术的基础。2.2动物细胞工程提问：植物体细胞杂交技术过程是怎样的？先用去除两种植物细胞的，使之成为，再用诱导其融合成，最后用的方法将其培育成新的。纤维素酶、果胶酶细胞壁原生质体聚乙二醇（PEG）杂种细胞植物组织培养植物体动植物细胞在结构上有什么区别？一.动物细胞融合2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合，也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。1.概念P52结果：杂交单核细胞2.原理：细胞膜的流动性、细胞增殖细胞A细胞B杂种细胞生物法：灭活的病毒（特有）物理法化学法3.过程：离心振动电激聚乙二醇（PEG）灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞（细胞膜具有一定的流动性）为什么能用灭活的病毒促进动物细胞融合？P52动物细胞A动物细胞B诱导，融合2个完整的杂交细胞AB有丝分裂注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞灭活的病毒有到动物细胞融合的过程P52（膜融合、质融合）（核融合）•4.意义：P52突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能•5.应用：P52利用杂交瘤技术制备单克隆抗体二.单克隆抗体传统的抗体生产方法有什么缺陷？抗体从何而来？浆细胞有什么特点？特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏抗体抗原动物体内刺激浆细胞能产生抗体，但每个B淋巴细胞最终只分泌一种特异性抗体二.单克隆抗体用单个进行无性繁殖，也就是通过形成所产生化学性质单一、特异性强的，即单克隆抗体。1.概念《学案》P42B淋巴细胞克隆细胞系抗体如何让B淋巴细胞无限增殖？B淋巴细胞产生抗体骨髓瘤细胞能无限增殖细胞融合杂交瘤细胞思路：2.单克隆抗体制备过程注射抗原目的：获得已免疫的B淋巴细胞或浆细胞B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合（灭活的病毒等）B-B细胞瘤-瘤细胞B-瘤细胞第一次筛选选择培养基（筛选杂交瘤细胞）杂交瘤细胞专一抗体检测（获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞）细胞培养（克隆）第二次筛选体外培养注射到小鼠腹腔（腹水中提取）获得单克隆抗体免疫原理、细胞融合原理、动物细胞培养原理2.过程:B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养杂交瘤细胞（B-瘤细胞）克隆化培养抗体检测产生特定抗体的杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体第一次筛选第二次筛选体内第一次筛选出杂交瘤细胞第二次筛选出能产生特异性抗体的细胞群3.单克隆抗体的应用•应用:疾病的诊断、治疗和预防。•优点P54:特异性强、灵敏度高，产量高。•实例P54:最广泛的用途：体外诊断试剂“生物导弹”（单克隆抗体+药物等）1、用a表示骨髓瘤细胞，b表示效应B细胞，则细胞融合过程中两次筛选的目的分别为A.a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养B.a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab培养C.a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体的ab培养D.a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖的aa培养C练习1、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产，不能体外生产2、“生物导弹”是指A、单克隆抗体B、带有特定药物的单克隆抗体C、杂交细胞D、B淋巴细胞DB练习3.单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是A．特异性强、灵敏度高B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌C去壁融合组培动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性融合过程先除去细胞壁先使细胞分散开诱导方法物理法、化学法物理法、灭活的病毒、化学法结果杂种植株杂交细胞应用培育植物新品种主要用于制备单克隆抗体意义突破远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖...
