考点1植物组织培养技术(5年13考)(重庆理综、四川理综,全国课标卷、山东卷、江苏卷,江苏卷,全国……)1.原理植物细胞的全能性
2.植物组织培养的过程外植体――→愈伤组织――→幼苗―→移栽植物组织培养常用的培养基是MS培养基,一般需要添加生长素和细胞分裂素两种植物激素
3.影响植物组织培养的因素(1)外植体的选择:材料本身的种类、年龄、保存时间长短等
(2)营养(3)植物激素①常用激素:生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素,在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用有加强的趋势
②使用激素顺序不同对实验结果的影响使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高③生长素用量与细胞分裂素用量的比值不同,对细胞发育方向的影响不同:比值高时,有利于根的分化,抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成;比值适中时促进愈伤组织的生长
(4)温度:一般将温度控制在18~22℃
(5)pH:一般将pH控制在5
(6)光照:每日用日光灯照射12h
4.植物组织培养的实验操作(1)菊花的组织培养过程制备MS培养基(配制母液、配制培养基、灭菌)―→外植体消毒―→接种―→培养―→移栽―→栽培
(2)月季的花药培养过程①过程:材料的选取―→材料的消毒―→接种和培养―→鉴定和筛选
②影响花药培养的因素主要有材料的选择和培养基的组成
③要挑选完全未开放的花蕾,确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法
实验操作中易错的几个问题(1)材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;月季的花药培养实验中,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养
(2)外植体消毒:所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0
1%的氯化汞溶液,所使用的清洗