检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质VIP免费

知识点3检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(一)实验原理该实验原理可简记为“三特”，即“特定的物质与特定的试剂反应呈现特定的颜色”。要点归纳物质试剂颜色还原糖斐林试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ液橘黄色脂肪苏丹Ⅳ液红色蛋白质双缩脲试剂紫红色(二)目的要求初步学会用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。(三)实验仪器和试剂(1)仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试管架，试管夹，大、小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，研钵，石英砂，纱布，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。(2)试剂：斐林试剂，苏丹Ⅲ染液，双缩脲试剂。(四)方法步骤A．还原性糖的鉴定1．选材：本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅，或近于白色的，如苹果和梨的果实。经试验比较，颜色反应的明显程度，依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。2．方法步骤：(1)制备生物组织样液(2)实验操作的方法和观察①向试管内注入样液2mL②向试管内注入斐林试剂2mL(由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成)振荡呈蓝色③水浴加热：煮沸2min左右④观察溶液颜色变化(3)结论：该溶液颜色变成砖红色，这说明组织样液中的还原糖与斐林试剂发生了反应，从而鉴定苹果组织中有还原性糖存在。B．脂肪的鉴定1．选材：实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花生种子(取其子叶)。供实验用的花生种子，必须提前浸泡3～4h。浸泡时间短了，不容易切成片；浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。2．方法步骤：(1)制备生物组织实验材料(组织切片)①取浸泡的花生种子一粒浸泡3～4h②做子叶的徒手切片：削下极薄的一片③做临时装片：载玻片中央滴一滴清水，用毛笔将薄片放到水滴中，盖好盖玻片(2)实验操作方法和观察①观察脂肪小颗粒：用显微镜观察薄片最薄处(最好一层细胞)②吸干水：用吸水纸③滴苏丹Ⅲ染液④观察脂肪颗粒颜色变化：用显微镜(先低倍后高倍)(3)结论：该颗粒可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，它是生物组织中的脂肪物质。从而鉴定花生种子(子叶)组织中有脂肪存在。花生子叶切片切得要薄(最薄处最好是一层细胞)，因为切片较厚就观察不清脂肪颗粒。D．蛋白质的鉴定1．选材：选材：实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官)，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋(卵白)或新鲜肝脏研磨液(因为里面富含酶，而酶的成分主要是蛋白质)。如用大豆，必须提前浸泡1～2d，这样容易研磨成浆。有条件的学校，可以直接采用现成的大豆磨成的豆浆，豆浆可以购买，也可用小型的榨汁机制取。如果用稀释的卵白或研磨的新鲜肝脏液做实验材料，实验效果会更好。(2)实验操作方法和观察①向试管内注入组织样液2mL(或蛋白稀释液2mL)②向试管内加入双缩脲试剂A摇匀③观察颜色反应④再向试管内加双缩脲试剂B：3～4滴摇匀⑤观察颜色变化(3)结论：组织样液加入双缩脲试剂A后，颜色变化为无色，再加双缩脲试剂B后，颜色的变化是紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏中有蛋白质。做鉴定蛋白质的实验时，在鉴定之前，要留出一些黄豆组织样液，以便用来与化学试剂发生反应后的颜色作对比，增强说服力。若不用豆浆，用蛋白稀释液或新鲜肝脏提取液做实验材料，应稀释到一定程度，如果稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管不易刷干净。