仅供医疗专业人士参考T790M血液检测：机遇与挑战EGFR突变型肺癌生物学和靶向治疗认知时间表TanCS,etal.LancetOncol.2015Sep;16(9):e447-59.基因检测改变了我们的临床实践EGFR突变和ALK检测不被常规推荐，除非不吸烟和小标本观念改变：检测已经成为必须腺癌、大细胞癌和组织学类型不明确型NSCLC：应进行EGFR突变、ALK、ROS1、广泛分子分析(BRAFV600E、MET扩增和外显子14点突变、RET重排、HER2突变)、PD-L1检测麟癌应该进行EGFR突变和ALK检测尤其在非吸烟人群或小标本或混合病理类型的标本中，其它检测包括广泛分子分析(BRAFV600E、MET扩增和外显子14点突变、RET重排、HER2突变)和PD-L1检测分子检测技术也随之不断发展金标准手术标本补充补充细胞学标本血液标本一、从组织检测发展到血液检测二、从定性检测到未来定量检测三、从单基因检测到多基因检测平台已知位点定性检测已知位点定量检测T790M突变检测的标本类型PirkerR,etal.JThoracOncol.2010;5(10):1706-1713.SavicS,etal.BrJCancer.2008;98(1):154-60.中国非小细胞肺癌血液EGFR基因突变中国专家共识.中华医学杂志.2015;95(45):3721-3725.组织活检(肿瘤蜡片)细胞学标本(恶性胸水)血液标本(ctDNA)检测结果可靠样本品质和肿瘤细胞含量与组织样本接近组织和胸水都取不到的患者，推荐使用血液样本侵入性，部分病人无法取样不是每个病人都有胸水无创，易采样标本获得分子检测金标准检测结果可靠，无法获得组织时可作补充DNA片段化/假阴性较多，需高敏感度技术质量控制可以使用ARMS方法进行检测可以使用ARMS方法进行检测可以使用dPCR或NGS等高灵敏度方法技术平台T790M突变检测的标本类型—血液检测组织活检(肿瘤蜡片)细胞学标本(恶性胸水)血液标本(ctDNA)检测结果可靠样本品质和肿瘤细胞含量与组织样本接近组织和胸水都取不到的患者，推荐使用血液样本侵入性，部分病人无法取样不是每个病人都有胸水无创，易采样标本获得分子检测金标准检测结果可靠，无法获得组织时可作补充DNA片段化/假阴性较多，需高敏感度技术质量控制可以使用ARMS方法进行检测可以使用ARMS方法进行检测可以使用dPCR或NGS等高灵敏度方法技术平台PirkerR,etal.JThoracOncol.2010;5(10):1706-1713.SavicS,etal.BrJCancer.2008;98(1):154-60.中国非小细胞肺癌血液EGFR基因突变中国专家共识.中华医学杂志.2015;95(45):3721-3725.“液体活检”入围2015年度MIT“十大突破技术”https://www.technologyreview.com/lists/technologies/2015/MagicLeapNano-ArchitectureCar-to-CarProjectLoonLiquidBiopsyMegascaleDesalinationApplePayBrainorganoidsSuperchargedPhotosynthesisInternetofDNA概要•T790M血液检测：机遇•Biomarker类型•临床应用•T790M血液检测：挑战•T790M血液检测：优化血液检测Biomarker-ctDNA&CTC&Exosome•循环肿瘤细胞(CTC)：存在于外周血中各类肿瘤细胞统称，因自发或诊疗操作从实体瘤病灶脱落，进入外周血循环系统•循环肿瘤DNA(ctDNA)：由肿瘤细胞释放到外周血中的DNA片段，来源于所有荷瘤部位，具有含量低，半衰期短，均质性等特点•外泌体(Exosomes)：由细胞分泌或者脱落的囊状小泡，直径约30-100nm，携带肿瘤细胞DNA，RNA和蛋白质等信息WangJYetal.,FrontMed,2017,2095-0225JiaSYetal.,Oncotarget,2017,8,33循环肿瘤DNA(ctDNA)的来源与功能•ctDNA来源:1.凋亡／坏死肿瘤细胞;2.正常生长肿瘤细胞;3.循环肿瘤细胞•ctDNA功能:基于Oncogenictransformation方式在肿瘤转移方面发挥重要作用•ctDNA分布:广泛存在于血浆，脑脊液，唾液，尿液等，均已得到相关研究证实ChengFFetal.,Oncotarget,2016,7,30DiMeoetal.,MolecularCancer,2017,16,80循环肿瘤DNA(ctDNA)的特性总量少–<500DNA拷贝数/200uL血浆ctDNA丰度低-0.01%-1%比例较多片段小–集中在170bp左右FractionofEGFRmutantintotalcfDNANumberofEGFRM+plasmasamples61376353activatingmutations,T790MNewmanetal.,NatMed(2014)Taniguchietal.,ClinCancerRes(2011)FrankDetal.,NatMed(2008)半衰期短–约为114min，<2小时Half-Life来源于血液ctDNA的信息分类：定量分析和序列分析JonothanC.M.Wan...
