. . . .word.zl. 一步一步学流式 第 一篇 ： 流 式 细 胞 术 的 历 史 概要说来，流式细胞术主要包括了样品的液流技术、细胞的分选和计数技术，以及数据的采集和分析技术等。FCM 目前开展的水平凝聚了半个世纪以来人们在这方面的心血和成果。 1934 年，Moldavan1 首次提出了使悬浮的单个血红细胞等流过玻璃毛细管，在亮视野下用显微镜进展计数，并用光电记录装置计测的设想，在此之前，人们还习惯于测量静止的细胞，因为要使单个细胞顺次流过狭窄管道容易造成较大的细胞和细胞团块的淤阻。1953 年 Crosland –Taylor 根据雷诺对牛顿流体在圆形管中流动规律的研究认识到：管中轴线流过的鞘液流速越快，载物通过的能力越强，并具有较强的流体动力聚集作用。于是设计了一个流动室，使待分析的细胞悬浮液都集聚在圆管轴线附近流过，外层包围着鞘液；细胞悬浮液和鞘液都在作层液。这就奠定了现代流式细胞术中的液流技术根底。 1956 年，Coulter 在多年研究的根底上利用 Coulter 效应生产了 Coulter 计数器。其根本原理是：使细胞通过一个小孔，只在细胞与悬浮的介质之间存在着导电性上的差异，便会影响小孔道的电阻特性，从而形成电脉冲信号，测量电脉冲的强度和个数那么可获得有关细胞大小和数目方面的信息。1967 年 Holm 等设计了通过汞弧光灯激发荧光染色的细胞，再由光电检测设备计数的装置。1973 年 Steinkamp 设计了一种利用激光激发双色荧光色素标记的细胞，既能分析计数，又能进展细胞分选的装置。这样就根本完成了现代 FCM 计数技术的主要历程。 现代的 FCM 数据采集和分析技术是从组织化学发源的，其开拓者是 Kamentsky。1965 年，Kamentsky 在组织化学的根底上提出了两个新设想：〔1〕细胞的组分是可以用光光度学来定量测定的，即分光光度术可以定量地获得有关细胞组织化学的重要信息。〔2〕细胞的不同组分可以同时进展多参数测量，从而可以对细胞进展分类。换句话说，对同一细胞可以同时获得有关不同组分的多方面信息，用作鉴别细胞的依据。 流式细胞术在细胞化学中的应用的先驱者是 Van Dilla 和美国的 Los Alamos 小组。他们在 1967 年研制出流液束、照明光轴、检测系统光轴三者相互正交的流式细胞计的根底上，首次用荧光 Feulgen 反响对 DNA 染色显示出 DNA 的活性与荧光之间存在着线性关系，并在 DNA 的直方图上清楚地显示出细胞周期的各个时相。Gohde 和 Dittrich ...
