婆枣根部内生细菌多样性的研究姓名：张青指导老师：崔娜完成时间：2014.5论文构架1研究目的和研究现状2实验方法3结果与分析4待讨论问题研究目的本实验采用传统培养方法，从新鲜婆枣根部分离、纯化根部内生细菌，研究婆枣根部内生细菌的多样性。可为开发婆枣细菌资源提供基础。国内外研究现状1876年Pasteur首次提取出了内生细菌国外，从28种健康植物的器官中分离出内生细菌并初步鉴定国内，起步较晚（20世纪70年代）相继对多种作物内生细菌进行相关研究研究深入，从30多种植物分离出80个属内生细菌实验方案统计内生细菌的种群数量记录其菌落形态特征生理生化指标简单测定测定16SrDNA序列PCR流程图配置扩增反应体系PCR扩增电泳测序相似性分析测菌属构建系统发育树实验结果及分析枣组织菌落数(×104cfu·g-1)菌株数种类根10.0438511表1枣根部组织内生细菌的分布情况培养基NAPDAKBTSACYMKMB蛋水牛肉菌种数55342223表2各种培养基菌种种类数表3分离得到婆枣根部内生细菌菌落编号大小形状颜色透明光泽边缘凹凸12mm圆形绿色否无整齐凸23mm圆形浅黄色否有整齐凸33mm椭圆形白色是无整齐凸43mm圆形棕绿色否无整齐凸54mm圆形乳白色否无整齐凸62mm圆形白色否有整齐凸73mm圆形黄色否无整齐凸82mm圆形白色否无整齐凸93mm椭圆形浅黄色是无整齐凸102mm圆形亮黄色否有整齐凸112mm椭圆形乳白色是无整齐凸123mm圆形白色否无整齐凸132mm圆形白色否无整齐凸141mm椭圆形乳白色否有整齐凸154mm椭圆形白色是无整齐凸163mm圆形浅黄色否无整齐凸172mm圆形浅黄色否无整齐凸182mm圆形乳白色否无整齐凸193mm圆形白色是有整齐凸生理生化测定革兰氏染色生理生化管反应大部分为革兰氏阳性菌，少部分为革兰氏阴性菌PCR扩增•将分离的细菌选取19个菌株进行标号（1,2,3……19），并将编号菌种依次命名为TXPZ-01-TXPZ-19。特异性地对16SrDNA部分区段进行扩增。图3电泳图谱1234567M图4枣内生细菌及其同源菌株基于16SrRNA序列的系统发育树菌属细菌编号芽孢杆菌属TXPZ-08,04,15假单胞杆菌TXPZ-03,17,05葡萄球菌属TXPZ-11,18节杆菌属TXPZ-10土壤杆菌属Aagrobacteriumsp.TXPZ-19Williamsiasp.TXPZ-07根瘤菌属TXPZ-01,06,13湿斯捷连科属TXPZ-14寡养单胞菌属TXPZ-16土地杆菌PedobacterTXPZ-02,12ChryseobacteriumTXPZ-9根据菌落菌体形态、培养性状和生理生化特性，结合16SrDNA序列分析可知，共分离出11属。待讨论问题简单传统培养方法单纯一个生长时期婆枣根部组织长期系统高精密研究多个生长时期婆枣的各个器官
