实验一、二:细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察 【基本原理】 细胞膜表面的有分支状糖外被,细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。凝集素(lectin)是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞表面间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构。可选择性地让某些物质进出细胞,各种物质出入细胞的方式是不同的,水是生物界最普遍的溶剂,水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散,以至于在高渗环境中,动物细胞会失水而收缩;在低渗环境中,动物细胞会吸水膨胀直至破裂。 本实验将红细胞分别放于各种等渗溶液中,由于红细胞膜对不同溶质的通透性不同,使得不同溶质透入细胞的速度相差很大,有些溶质甚至不能透入细胞。当溶质分子进入细胞后可引起渗透压升高,水分子随 即 进入细胞,使细胞膨胀,当膨胀到 一定 程 度时 ,红细胞膜会发生破裂,血 红素溢 出,此 时 ,原 来 不透明 的红细胞悬 液突 然 变 成红色 透明 的血 红蛋白溶液,这 种现 象 称 为 红细胞溶血 。由于各种溶质进入细胞的速度不同,所 以不同的溶质诱 导 红细胞溶血 的时 间不同,相反可通过测 量 溶血 时 间来 估 计 细胞膜对各种物质通透性的大小 。 【方法步骤】 1. 制备 土 豆 凝集素液和红细胞悬 浮 液,制备 无 血 清 的鸡 红细胞悬 液,使凝集素液和红细胞悬 液混 合,静 置 后,在光 镜 (低倍 )下 观 察 凝集素使红细胞凝集的现 象 。(以PBS 缓 冲液加2% 血 细胞作对照实验)[土豆凝集素的制备: 称 取 土 豆 去 皮 块 茎 2g , 加10 mL PBS缓 冲 液,浸 泡 2h(浸 出的粗 提 液中含有可溶性土 豆 凝集素) , 载 玻 片 上 滴 一滴 土 豆 凝集素,再 滴 一滴 2% 红细胞液,充 分混 匀 静 置 20 min , 低倍 显 微 镜 下 观 察 血 球 凝集现 象 。] 2. 观 察 10%的鸡 红细胞悬 液,可见 该 悬 液为 一种不透明 的红色 液体 3. 观 察 溶血 现 象 取 一支试 管 ,再 加入4ml 蒸 馏 水,加入0.4ml 鸡 红细胞悬 液,混 匀 后注 意观 察 溶液颜 色...