选修3 现代生物科技专题 专题1 基因工程 1.1 DNA 重组技术的基本工具 （一）思考与探究 1.限制酶在DNA 的任何部位都能将DNA 切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA 片段： (1) …CTGCA (2) …AC (3) GC… …G …TG CG… （4） …G (5) G… (6) …GC …CTTAA ACGTC… …CG (7) GT… (8)AATTC… CA… G… 你是否能用DNA 连接酶将它们连接起来？ 答： 2和7能连接形成…ACGT… …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… …GACGTC…。 2.联系你已有的知识，想一想，为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身的DNA？ 提示：迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断 DNA 上特定的碱基序列。细菌中限制酶之所以不切断自身 DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的DNA 可以降解掉。生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA 分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA 被切断，并且可以防止外源DNA 的入侵（本题不要求学生回答的完全 ，教 师 可参 考教 师 用书 中的提示，根 据 学生的具体 情 况 ，给 予 指 导 。上述 原 则 也应 适 用于其他 章 节 中有关 问 题的回答。）。 3.天 然 的DNA 分子可以直 接用做 基因工程载 体 吗？为什么？ 提示：基因工程中作为载体使用的DNA 分子很多都是质粒（plasmid），即独立于细菌拟核处染色体DNA 之外的一种可以自我复制、双链闭环的裸露的DNA 分子。是否任何质粒都可以作为基因工程载体使用呢？其实不然，作为基因工程使用的载体必需满足以下条件。 （1） 载体DNA 必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。 （2） 载体DNA 必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA 上随染色体DNA 的复制而同步复制。 （3） 载体DNA 必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。 （4） 载体DNA 必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入...
