课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数考点要求 1．研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。 2．能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。双基过关一、理论基础 1．筛选菌株 (1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件 ( 包括营养、温度、pH等) ，同时或其他微生物生长。(2) 选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。（3）配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物可以选择培养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养；的微生物 . 加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。 2．统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。此外，测定微生物数量的常用方法还有直接计数。 3．设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养的培养基作为空白对照。二、实验设计关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下： 1．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。应先 3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的中。 2．制备：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。 3．微生物的与观察将 10g 土样加入盛有90 mL 无菌生理盐水的锥形瓶中( 体积为 250 mL) ，充分摇匀，吸取上清液，转移至盛有的生理盐水的无菌大试管中，将土样以1、101、102⋯⋯依次等比稀释至 107稀释度，并按照由107～103 稀释度的顺序分别吸取进行平板涂布操作。每个稀释度下需要3 个选择培养基、1 个牛肉膏蛋白胨培养基。将涂布好的培养皿放在30℃温度下培养，及时观察和记录。 挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含培养基的斜面中，观察能否产生如教材中图2-lO 的颜色反应。 4 ．细菌的计数当菌落数目稳定时，选取菌落数在的平板进行计数。在同一...
