下载后可任意编辑植物乙酰辅酶 A 羧化酶( ACC) 酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供讨论使用 目的: 本试剂盒用于测定植物组织, 细胞及相关液体样本中乙酰辅酶 A 羧化酶( ACC) 的活性。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物乙酰辅酶 A 羧化酶( ACC) 水平。用纯化的植物乙酰辅酶 A 羧化酶( ACC) 抗体包被微孔板, 制成固相抗体, 往包被单抗的微孔中依次加入乙酰辅酶 A 羧化酶( ACC) , 再与 HRP 标记的乙酰辅酶A 羧化酶( ACC) 抗体结合, 形成抗体-抗原-酶标抗体复合物, 经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色, 并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙酰辅酶 A 羧化酶( ACC) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值) , 经过标准曲线计算样品中植物乙酰辅酶 A 羧化酶( ACC) 活性。试剂盒组成: 试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存说明书1 份1 份封板膜2 片( 48) 2 片( 96) 密封袋1 个1 个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品: 2700 U/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存显色剂 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存显色剂 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存终止液3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存浓缩洗涤液( 20ml×20 倍) ×1 瓶( 20ml×30 倍) ×1 瓶2-8℃保存样本处理及要求: 1. 细胞培育上清: 检测分泌性的成份时, 用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 下载后可任意编辑 -3000 转/分) 。认真收集上清。检测细胞内的成份时, 用 PBS( PH7.2-7.4) 稀释细胞悬液, 细胞浓度达到 100 万/ml 左右。经过重复冻融, 以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( -3000 转/分) 。认真收集上清。保存过程中如有沉淀形成, 应再次离心。2. 组织标本: 切割标本后, 称取重量。加入一定量的 PBS, PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后依旧保持 2-8℃的温度。加入一定量的PBS( PH7.4) , 用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右( -3000 转/分) 。认真收集上清。分装后一份待检测, 其余冷冻备用。3. 标本采集后尽早进行提取, 提取按相关文献进行, 提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验...
