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胡萝卜愈伤组织的诱导与继代培养试验报告

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本科学生综合性实验报告学号姓名学院 生命科学学院专业、班级实验小组及成员实验课程名称植物组织培养实验教师及职称龙维彪(讲师)开课学期2011 至2012 学年下学期填报时间2012 年6 月1 日云南师范大学教务处编印1 一.实验设计方案实验序号二实验名称胡萝卜愈伤组织的诱导和增殖培养实验时间2012.04.05— 2012.05.24 实验室实验室 325 实验内容:1 胡萝卜愈伤组织诱导培养基的配制2 胡萝卜愈伤组织的诱导3 胡萝卜愈伤组织继代培养基的配制4 胡萝卜愈伤组织的继代培养1.实验目的1)通过本次实验,进一步熟悉配制培养基的流程及操作中应注意的事项,学会设计和筛选胡萝卜愈伤组织诱导培养基配方。2)通过本次实验,能够熟练掌握外植体的表面消毒技术和无菌操作技术。3)通过本次实验, 能够熟练掌握愈伤组织继代培养的基本操作技术,进一步熟悉、规范无菌操作技术。2. 实验原理、实验流程或装置示意图实验原理1)将事先配制好的培养基母液按一定比例稀释至浓度为培养基中规定的使用浓度,再加入琼脂、蔗糖、生长调节物质等,制备成符合要求的培养基。2)将胡萝卜的贮藏根(根的变态)表面消毒后切割成小块接种于愈伤组织诱导培养基上,诱导外植体脱分化产生愈伤组织。3)对愈伤组织进行继代培养可以得到更多的愈伤组织。实验流程配置胡萝卜愈伤组织诱导培养基接种胡萝卜肉质根诱导愈伤组织产生配置胡萝卜愈伤组织增殖培养基接种胡萝卜愈伤组织进行增殖实验结果观察记录3.实验设备及材料1)实验用具和仪器冰箱、普通天平、三角瓶、果酱瓶、移液管、量筒、烧杯、容量瓶、玻璃棒、医用口杯、精密pH 试纸( pH5.4~7.0)、药勺、称量纸、标签纸、封口膜、橡皮筋、棉线、电炉、高压蒸汽灭菌锅、电磁炉等。酒精棉球、小块纱布、已灭菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、超净工作台、恒温培养箱、100ml三角瓶、 500 或 1000ml 搪瓷杯、 50ml 量筒、 1ml、2ml、5ml、10ml 吸管等。2)药品和试剂:MS 培养基母液、常用试剂母液、 琼脂、蔗糖、生长调节物质、 蒸馏水、1mol·L-1HCl 、1mol·L-1NaOH 、胡萝卜愈伤组织诱导培养基、无菌水、75%酒精、 0.1%HgCl2,、愈伤组织继代培养基、蒸馏水等。3)材料:胡萝卜肉质直根、处于脱分化进程中的胡萝卜愈伤组织1 4.实验方法步骤及注意事项实验步骤:(1)胡萝卜愈伤组织诱导培养基的配方及配制体积A、培养基配方设计:a 根据培养的目的选择一种培养基为基本...

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