试验五：果蝇唾液腺试验概论

实验五果蝇唾液腺染色体的观察及制备一、目的1．掌握剖离果蝇幼虫唾液腺的技术。2．掌握制作果蝇唾液腺染色体玻片标本的方法。3．观察果蝇唾液腺染色体的形态特征。4. 了解体细胞染色体联会现象。二、原理1. 双翅目昆虫（摇蚊、果蝇等）幼虫期的唾液腺细胞巨大，其中的染色体称为唾液染色体（ salivary chromosome ）。这种染色体比普通染色体大的多，宽约 5μ m,长约 400μ m，相当于普通染色体的100～150 倍，因而又称为巨型染色体。唾液腺染色体经过多次复制而不分开，大约有1 000 ～4 000 根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体（polytene chromosome ）。多线染色体染色后，出现深浅不同、 疏密各别的横纹， 这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的很多特征。例如染色体有缺失、重复、到位、易位等，很容易在唾液腺染色体上识别。2. 黑复果蝇的唾液腺染色体是2n=2*4=8( 图一 ) ，但因体细胞配对，又因短小的第 4 染色体和 X 染色体的着丝粒在端部所以染色体的一端在染色中心上，看上去，各自只形成一条线状和点状染色体。只有第2 和第 3 染色体的着丝粒在中央，它们从染色中心以V 字形向外伸出（ 2L，2R，3L，3R），因此共有 6条（图二）图一图二在显微镜下， 短小的第 4 染色体有时不易观察到， 所以最容易识别的是第5（图三）雄果蝇的Y染色体几乎包含在染色中心里，因为是异染色质，看起来很淡。唾液染色体上的横纹宽窄、浓淡是一定的，但在果蝇的特定发育时期，它们会出现的膨胀，这称为疏松区（puff ），目前人们认为这是这部分基因被激活的标志。图三3. 唾液腺染色体的另一特点是体细胞中同源染色体处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋白纤维丝唾液腺染色体（salivary gland chromosome）是一类存在于双翅目昆虫，如果结合在一起，紧密盘绕。所以细胞中染色体只呈单倍数。黑腹果蝇的染色体数目 2n=8 其中第Ⅱ、第Ⅲ染色体为中部着丝粒染色体，第Ⅳ染色体和第IX 染色体为端着丝粒染色体。唾液腺染色体形成时，染色体着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚于一起形成一个染色中心（chromo-center ），所以在光学显微镜下可见从染色中心处伸出6 条配对的染色体臂，其中5 条为长臂， l 条为紧靠染色中心的很短的臂。唾液腺染色体经染色后，呈现深浅不同，疏密各异的横纹（band）。这些横纹的数目，位置，宽窄及排列顺...