流式细胞仪技术及专利研究新进展 (高金湖 无锡荣兴科技有限公司生物化学部) 流式细胞术(Flow Cytometer, FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,与传统的荧光镜检查相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点,成为当代最先进的细胞定量分析技术
流式细胞仪主要由细胞流动室、激光聚焦区、检测系统、数据处理系统等 4 部分组成,其工作原理是将被检测对象如细胞等制备成一定浓度的分散的细胞悬液,经特异性荧光染料染色后放入流式细胞仪的样品管中,细胞在气体的压力下进入流动室、流动室由样品管和鞘液管组成,在鞘液的约束下,细胞排列成单列从流动室的喷嘴高速喷出成为细胞液粒,经特异性荧光染色后的细胞经过激光检测区时受激光激发,产生散射光和荧光信号,通过一些波长选择通透性滤光片,可以将不同波长的散射光和荧光信号区分开来,散射光是从细胞表面或细胞内颗粒散射出来的原激光光谱,其信号比较强,用光敏二级管即可检测
荧光信号较弱,需用光电倍增管接收并放大,散射光和荧光信号接收后经转换成电信号,这些信号经过加工处理储存于计算机中,用专门的计算机软件对其储存的数据进行图像处理,可在计算机上直观地统计出各种染上荧光染料的细胞的百分率,选择不同的单克隆抗体及荧光染料,可同时测定一个细胞上的多种不同的特征如细胞大小、DNA 含量、细胞表面抗源表达、癌基因蛋白等等
市场上销售的流式细胞仪产品种类很多,主要生产厂家有:BD、Beckman-Coulter、Partec、Accuri Cytometers、Guava、Union Biometrica、Amnis 等,比较熟悉的还是 BD 和 Beckman Coulter
各个公司仪器的用法会有所不同,但原理是完全一致的
BD 公司生产的流式细胞仪都冠以 FA