实验一食用菌母种制作一、目的要求：1、了解母种培养基制作过程，理解灭菌原理；2、掌握母种培养基的制备方法；3、了解无菌操作基本原理，掌握母种的无菌接种培养方法。4、了解和掌握食用菌组织分离法的方法步骤；5、熟练分离出栽培用菌种。二、主要仪器设备及药品材料：灭菌锅、超净工作台、酒精灯、电炉、铝锅、漏斗、纱布、菜刀、砧板、烧杯、捆扎绳、硅胶试管塞、试管（18x180mm）、手术刀、镊子、 75%酒精、马铃薯、葡萄糖、琼脂、平菇子实体。三、实验步骤与方法 : ①培养基的制作1 PDA培养基配方马铃薯 200 克, 葡萄糖 20 克, 琼脂 20 克, 水 1000 毫升. 2. 母种培养基的配制(1) 熬制。马铃薯洗净，挖芽去皮。称取200 克，切成玉米大小颗粒或薄片。量筒量取1000 毫升水，铝锅中煮沸后记时30 分钟。四层纱布过滤于量杯中。滤液倒入锅中文火加热，加入葡萄糖和琼脂，不断搅拌，直到琼脂溶化。补足水量至 1000 毫升。(2) 分装试管。将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。培养基高度为试管长度的 1/5 左右，注意避免培养基沾于试管口外。分装完成后，盖紧硅胶塞。（3）捆把。 7 支试管为一捆，用牛皮纸包裹试管口，用捆扎绳扎紧。贴上标签，准备灭菌。（4）灭菌。注意加足水量和排气，灭菌完成后降压不能太快。（5）摆斜面，培养基长度约为试管长度的1/2 。斜面试管上覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布，防止试管内产生过多的冷凝水。①菌种分离与培养（1）种菇选择。选取无杂菌感染，无病虫害，出菇均匀，适应性强的子实体，要求个体健壮，朵大肉厚，外形规整，出菇早，约七八成熟的新鲜子实体。子实体采收后切去大部分菌柄，放入干净器皿内备用。（2）母种分离（组织分离法） 。在分离前用 75%的酒精棉球擦菇体进行表面消毒， 在超净工作台内将子实体撕开，用消毒刀片在菌盖与菌柄交接处的组织上取一小块 （绿豆大小） 移至试管斜面培养基的适当位置，迅速塞上硅胶塞。将分离的试管放在室内避光培养7-8 天，检查菌丝生长情况。四、实验结果每人制作平菇母种一支。记录母种菌丝的生长情况。五、作业1. 食用菌菌种分离有哪些方法？实际生产中最常用的方法是哪一种？该方法有何优点？2. 组织分离法制作母种成功的关键是什么？在操作中如何避免母种制作失败？实验二食用及药用菌原种制作技术目的要求：1、了解原种培养基的配制原理及过程；2、掌握玉米粒原种的制作方法。重点与难点 : 重点: 母种培养基制作过程 ;...
