dna测序仪专业课件VIP免费

元素周期表的发现奠定了二十世纪物理、化学研究和发展的基础元素周期表“基因组序列图”将奠定二十一世纪生命科学研究和生物产业发展的基础！“基因组”----生命科学的“元素周期表”人体解剖图奠定了现代医学发展的基础生命的奥秘蕴藏于“四字天书”之中…GCTTCTTCCTCATTTTCTCTTGCCGCCACCATGCCGCCACCATCATTTTCTCTTGCCGCCACCATGCTTCTTCCTCATTTTCTCTCCACCATGCCGCCACCACGCCACCATGCTTCTTCCTCATCTCGCTTTCTTGCCGCCACCATGCCGCCACCGCTTCTTCCtTCTCT…了解生命现象、解释疾病的发生、诊断和治疗疾病了解生命现象、解释疾病的发生、诊断和治疗疾病，是生命科学的核心内容之一，是生命科学的核心内容之一核酸和蛋白质核酸和蛋白质是控制生命过程的两种重要大分子，是控制生命过程的两种重要大分子，其结构或功能异常是导致遗传性疾病或遗传相关性其结构或功能异常是导致遗传性疾病或遗传相关性疾病的主要因素或相关因素，是生命科学研究的主疾病的主要因素或相关因素，是生命科学研究的主要对象要对象核酸分子携带生命活动的全套信息，其基本结核酸分子携带生命活动的全套信息，其基本结构构――核苷酸核苷酸的线性排列构成它的一级结构的线性排列构成它的一级结构蛋白质的一级结构是指构成蛋白质的基本单位蛋白质的一级结构是指构成蛋白质的基本单位－－氨基酸氨基酸的排列顺序，研究蛋白质的一级结构的排列顺序，研究蛋白质的一级结构是了解蛋白质功能的基础是了解蛋白质功能的基础第一节全自动第一节全自动DNADNA测序仪测序仪DNADNA测序核苷酸序列测序核苷酸序列早期：小片段重叠法早期：小片段重叠法通过测定通过测定RNARNA序列来推测序列来推测DNADNA序列序列缺点：既缺点：既费时费时又又不准确不准确2020世纪世纪8080年代以后：年代以后：DNADNA自动测序仪自动测序仪SangerSanger双脱氧链末端终止法双脱氧链末端终止法Maxam-GilberMaxam-Gilber化学降解法化学降解法优点：优点：操作简单、安全、快速、准确操作简单、安全、快速、准确SangerSanger双脱氧链末端终止法双脱氧链末端终止法Maxam-GilberMaxam-Gilber化学降解法化学降解法都是根据在某一都是根据在某一固定固定的点的点开始开始核苷酸链的核苷酸链的延伸延伸，，随机随机在某在某一个一个特定特定的碱基处的碱基处终止终止，产生，产生AA、、TT、、CC、、GG四组不同四组不同长度的一系列核苷酸链，在变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳进长度的一系列核苷酸链，在变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳进行片段的分离和检测，从而获得行片段的分离和检测，从而获得DNADNA序列序列双脱氧链末端终止法双脱氧链末端终止法更简便和更适合于光学自动探测，故更简便和更适合于光学自动探测，故在全自动在全自动DNADNA测序仪中应用广泛测序仪中应用广泛原理原理一个末端标记的一个末端标记的DNADNA片段在片段在44组互相独立的化学反应中分别得到部分组互相独立的化学反应中分别得到部分降解，其中每一组反应特异的针对某一种或某一类碱基。因此生成降解，其中每一组反应特异的针对某一种或某一类碱基。因此生成44种放射性标记的分子，从共同起点（放射性标记末端）延续到发生化种放射性标记的分子，从共同起点（放射性标记末端）延续到发生化学降解的位点。每组混合物中均含有长短不一的学降解的位点。每组混合物中均含有长短不一的DNADNA分子，其长度取分子，其长度取决于该组反应所针对的碱基在原决于该组反应所针对的碱基在原DNADNA全片段上位置。此后，各组均通全片段上位置。此后，各组均通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离，再通过放射自显影来检测末端标记过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离，再通过放射自显影来检测末端标记的分子。的分子。Maxam-Gilber化学降解法基本步骤基本步骤第一步，对特定碱基（或特定类型的碱基）进行化学修饰；第一步，对特定碱基（或特定类型的碱基）进行化学修饰；第二步，修饰碱基从糖环上脱落，修饰碱基第二步，修饰碱基从糖环上脱落，修饰碱基55和和33的磷酸二的磷酸二酯键断裂；酯键断裂；第三步，比较第三步，比较GG、、A+GA+G、、C+TC+T、、CC以及以及A>CA>C各个泳道，可从各个泳道，可从测序凝...