石 蜡 切 片 制 作 一 、苏木精-伊红对染法 ——paraffin section 一、器材及试剂: 1. 器材: 切片刀,切片机,恒温箱,蜡杯,酒精灯,解剖刀,解剖剪,解剖盘,培养皿,镊子,单面刀片,毛笔,包埋盒,染色缸,盖玻片,载玻片,玻片盘,树胶,树胶瓶,显微镜,温度计,脸盆,水浴锅。 切片机,切片刀,温台,恒温箱,解剖刀,镊子,剪刀,解剖针,单面刀片,小台木,洒精灯,包埋纸盒,染色缸,烧杯,水盆,熔蜡炉,蜡杯。 2.试剂: 中性福尔马林固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液, 1%伊红酒精溶液,1%盐酸酒精溶液,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。 卡诺(Carnoy)固定液,埃利希苏木精染液,1%伊红酒精溶液,1%盐酸乙醇液,各级酒精(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%),二甲苯,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。 3. 材料: 鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的根、茎、叶等。 二、实验原理: 石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简 称H.E.对染法)是组织切片最常用 的染色方 法。这 种方 法适 用 范 围 广 泛 ,对组织细 胞 的各种成 分 都可 着 色,便 于全 面观 察 组织构 造 ,而 且 适 用 于 各种固定液固定的材料,染色后 不 易 褪 色可 长 期保 存 。经 过 HE 染色,细 胞 核 被 苏木素染成 蓝 紫 色,细 胞 质 被 伊红染色呈 粉 红色。 三 、试剂配 法: 1.中性甲醛 固定液: 甲醛 (37%-40%,市 售 ,本所 购 买 即 为 此 浓度) 100mL 磷 酸氢 二钠 6.5 磷 酸 二 氢 钾 ( 钠 ) 4g 双 蒸 水 900mL 2. 苏 木 精 、 伊 红 染 色 液 为 碧 云 天 产 品 3. 1%盐 酸 乙 醇 液 盐 酸 1 份 70%酒 精 100 份 4. 甘 油 蛋 白 贴 片 剂 : 蛋 白 50 ml 甘 油 50 ml 水 杨 酸 钠 ( 防 腐 剂 ) 1g 配 制 时 将 鸡 蛋 一 个 打 破 入 碗 或 杯 中 , 去 蛋 黄 留 下 蛋 白 , 用 玻 棒 调 打 成 雪 花 状泡 沫 , 然 后 用 粗 纸 或 双 层 纱 布 过 滤 到 量 筒 中 , 经 数 小 时 或 一 夜 , 即 可 滤 出 透 明 蛋白 液 。 此 时 在 其 中 再 ...