光合细菌的分离培养 光合细菌(Photosynthetic Bacteria,略作PSB)是一大类能进行光合作用的原核生物的总称。除蓝细菌外,都能在厌氧光照条件下进行不产氧的光合作用。研究与应用的实践表明,光合细菌在高浓度有机废水处理与资源化、水产养殖的水质调控与促进健康生长、在农业生产中作为高效活性菌肥等方面,发挥着十分有益的和令人瞩目的作用。关于光合细菌的类群、形态与生理特征、在生态系统中的地位和作用等内容,请参考有关文献与专著。这里仅就光合细菌的分离、培养方法作一介绍。 1 光合细菌的富集培养的一般方法 ① 分离源 光合细菌四个科-红螺菌科(Rhodospirillaceae)、着色菌科(Chromatiaceae)、绿菌科(Chlorobiaceae)、绿色丝状菌科(Chloroflex aceae)的各种菌,广泛分布于地球生物圈的各处。作为光合细菌的分离源 ,一般可从富营养化的湖泊、池沼、海滩、以及水田、硫黄泉、灌水土壤、和污水厂活性污泥、畜牧场水沟等厌氧或缺氧环境采样。在较深的水体,可使用采水器采取厌氧层的水。在较浅的地方,可直接用吸管吸取带底泥的水。采样的同时记录水温、pH、有无 H2S 气味等项内容。将采集到的水样或泥样放在厌氧、低温条件下,带回实验室进行分离。 ② 光合细菌富集培养基 用于光合细菌富集培养用的培养基有许多配方,这里仅介绍日本星野氏推荐的基本培养基 I 和基本培养基 I I 。前者适合于红螺菌科的光合细菌,后者适用于着色菌科和绿菌科的菌。 基本培养基 I : KH2PO4 0.5g K2HPO4 0.6g (NH4)2SO4 1.0gMgSO4·7H2O 0.2g NaCl 0.2g CaCl2·2H2O 0.05g 酵母浸出汁 0.1g微量元素溶液(见后)1mL生长因子溶液(见后)1mL 蒸馏水1000ml以上配制成的培养基 pH 值约 6.7 根据需要,可在上述培养基中添加一些成分,如富集的是缺少同化型硫酸还原系的菌种,则可在基本培养基 I 中加入 0.01%硫代硫酸钠;如是海洋性菌种,可加入3%NaCl 等等。另外,如分离源中含有较多的硫酸还原菌时(尤其是采自海洋的样品),为了抑制硫酸还原菌的生长,可把基本培养基I 中的(NH4)2SO4、MgSO4·7H2O 替换成NH4Cl 和MgCl2·6H20。 含单一有机化合物的基本培养基I 配置方法如下: ① 在容积为20mL 的螺口试管中,加入最终浓度为一定量(0.05~0.1%)的有机物。 ② 加入基本培养基I 至1/2 试管的量,松松地旋上螺盖。 ③ 121℃,灭菌15 分钟。 ④ 冷却后加入过滤除菌的10%抗坏血酸钠溶液 0.1mL...