精品文档---下载后可任意编辑APP 外膜脂蛋白基因克隆、原核表达及免疫原性初步讨论的开题报告题目:APP 外膜脂蛋白基因克隆、原核表达及免疫原性初步讨论讨论背景:β-淀粉样蛋白前体(APP)是阿尔茨海默病(AD)的重要病理蛋白,APP 的代谢异常导致淀粉样 β 物的形成,是 AD 发病的重要因素之一。APP 外膜蛋白是由 APP切割后的 C 端多肽产生的,其具有免疫原性。因此,APP 外膜蛋白的免疫学讨论很有意义,不仅有助于阿尔茨海默病的治疗,同时也对免疫调节与免疫疫苗的讨论有一定的意义。本讨论拟利用基因工程技术克隆 APP 外膜脂蛋白基因并进行原核表达,探究其免疫原性,为阿尔茨海默病的治疗提供新的思路。讨论内容:1.设计外膜脂蛋白基因的引物,从 AD 患者的外周血中提取总 RNA,进行逆转录PCR 扩增,获得 APP 外膜脂蛋白基因;2.将克隆的 APP 外膜脂蛋白基因构建到原核表达载体中,进行原核表达;3.分离得到表达的重组蛋白,通过 Western blotting 检测其表达情况,利用兔抗鼠 IgG 一抗和 HRP 标记的羊抗兔次抗进行检测;4.利用 ELISA 检测重组蛋白的免疫反应性,评价其免疫原性,探讨其在阿尔茨海默病治疗中的潜在应用。讨论意义:本讨论拟利用基因工程技术克隆 APP 外膜脂蛋白基因并进行原核表达,探究其免疫原性,为阿尔茨海默病的治疗提供新的思路。通过本讨论的开展,有望为阿尔茨海默病的治疗提供新的策略和方法,同时对免疫调节与免疫疫苗的讨论也具有一定的意义。