精品文档---下载后可任意编辑RASSF1A 与肺癌 A549 细胞对顺铂敏感性关系的讨论的开题报告开题报告题目：RASSF1A 与肺癌 A549 细胞对顺铂敏感性关系的讨论讨论背景：肺癌是当前全球死亡率最高的恶性肿瘤之一，其中非小细胞肺癌占比较大。顺铂是常用的肺癌化疗药物之一。然而，随着顺铂的广泛应用，许多患者出现耐药现象，因此讨论肺癌患者对顺铂的敏感性及其调节因素对于临床治疗有重要意义。RASSF1A（Ras association domain family 1 isoform A）是一种肿瘤抑制基因，其在多种癌症中表达降低或失活，与肺癌的发生、进展及临床预后密切相关。讨论目的：本讨论旨在探究 RASSF1A 与肺癌 A549 细胞对顺铂敏感性之间的关系及其机制。讨论方法：1. 细胞培育：采纳传统的细胞培育方法，将 A549 细胞以密度为1×10^6 个/ml 的方式接种于含 10%胎牛血清的 DMEM 中，并在5%CO2、37℃下孵育。分别加入 0、5、10、20、40、80、160 μmol/L 顺铂进行耐药试验。2. RNA 干扰：通过 RNA 干扰技术，选取 siRNA 克隆进行转染，降低 RASSF1A 表达水平，Western blotting 检测转染效率。3. MTT 法： 细胞根据以下处理方法进行实验：1）仅加入RASSF1A siRNA；2）仅加入顺铂；3）加入 RASSF1A siRNA 和顺铂；4）加入对比物，测定细胞的增殖、存活情况并计算细胞的 IC50 值。4. Western blotting： Western blotting 检测 RASSF1A 和凋亡相关蛋白的表达变化。预期结果：1. A549 细胞对顺铂的敏感性逐渐下降，通过计算 IC50 值确定顺铂敏感程度。精品文档---下载后可任意编辑2. RASSF1A siRNA 转染后 A549 细胞对顺铂的敏感性下降，IC50值升高。3. RASSF1A siRNA 干扰后，凋亡相关蛋白表达变化，预示着RASSF1A 与细胞凋亡途径相关。结论：本讨论结果将探究 RASSF1A 与肺癌 A549 细胞对顺铂敏感性之间的关系及其机制，为深化讨论 RASSF1A 作为肺癌敏感性调控因子的讨论提供一定的理论基础，有助于满足临床对肺癌生物学开展的要求，推动肺癌的临床治疗和预后。
