精品文档---下载后可任意编辑Survivin shRNA 慢病毒载体构建的开题报告开题报告题目:Survivin shRNA 慢病毒载体构建一、讨论背景Survivin 是一种抗凋亡蛋白,在肿瘤组织中高表达。它的高表达与恶性肿瘤的发生、进展、预后密切相关。在抑制 Survivin 的表达或功能方面,有望对肿瘤治疗产生积极作用。shRNA 慢病毒载体转染技术是基因沉默、基因治疗等讨论的一项重要方法。因此,构建 Survivin shRNA慢病毒载体具有重要意义。二、讨论目的本讨论旨在通过构建 Survivin shRNA 慢病毒载体来讨论降低Survivin 表达对肿瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响,为肿瘤治疗提供新的思路。三、讨论内容和方法(1)构建 Survivin shRNA 慢病毒载体将 Survivin shRNA 序列合成后通过限制性内切酶切割,与慢病毒载体质粒 pSIH1-H1-copGFP 连接,构建 Survivin shRNA 慢病毒载体。(2)病毒包装与转染将 Survivin shRNA 慢病毒载体与辅助质粒、包装质粒共同转染293T 细胞,包装生产 Survivin shRNA 慢病毒。使用病毒及空载体分别转染目标癌细胞,分析降低 Survivin 表达后对增殖、凋亡和迁移的影响。四、讨论意义本讨论将构建 Survivin shRNA 慢病毒载体对降低 Survivin 表达进行了探讨,有望为肿瘤治疗提供新的思路。另外,讨论所得数据有助于揭示 Survivin 在肿瘤生长过程中的作用机制,具有较高的理论和实践的应用价值。