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Tip60磷酸化和p400对Tip60活性及DNA双链断裂修复通路的调控的开题报告

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精品文档---下载后可任意编辑Tip60 磷酸化和 p400 对 Tip60 活性及 DNA 双链断裂修复通路的调控的开题报告开题报告题目:Tip60 磷酸化和 p400 对 Tip60 活性及 DNA 双链断裂修复通路的调控一、讨论背景及意义Tip60 (Tat-interactive protein 60),是一种高度保守的组蛋白乙酰转移酶,参加多种细胞生命活动,特别是对 DNA 修复、转录和细胞增殖等有重要作用。Tip60 能够促进 DNA 双链断裂修复途径,因此在维持基因组稳定性方面起着重要作用。尽管 Tip60 已经被广泛讨论,但其调控机制及调控因子并不清楚。目前已经有讨论发现 Tip60 能够被不同的 post-transcriptional modifications 调控,其中之一是磷酸化。磷酸化在许多细胞进程中发挥重要作用,因此 Tip60 的磷酸化可能会影响其活性。p400 是一种 ATP依赖性重组蛋白复合物,已经被证实能够调控 Tip60 酰化和染色质结构。p400 和 Tip60 的杂交复合物已经被证实与 DNA 锚定和修复有关,说明p400 与 Tip60 可能会协调修复 DNA 断裂。综上所述,Tip60 的磷酸化和与 p400 的相互作用可能会影响Tip60 的活性和对 DNA 双链断裂的修复,因此值得进一步讨论。二、讨论目的1. 确定 Tip60 磷酸化对其活性的效应。2. 探究 p400 如何影响 Tip60 的活性及其对 DNA 双链断裂的修复。3. 讨论 Tip60 的磷酸化和 p400 的相互作用对 DNA 双链断裂修复途径的影响。三、讨论方法1. 制备 Tip60 表达质粒,进行断裂修复功能的多种试验: 对Tip60、Tip60 磷酸化位点变异体和 p400 进行免疫共沉淀、蛋白质互作、荧光分子振荡共振能量转移和荧光共聚焦显微镜检测等。2. 通过免疫含量法和其他生化评估对 Tip60 的磷酸化进行定量分析。精品文档---下载后可任意编辑3. 在细胞系中使用 RNA 干扰或转形诱导抑制来检测 Tip60 和 p400蛋白质在 DNA 修复过程中的作用。4. 使用 DNA 链断裂恢复实验来评估 Tip60 及其变异体和 p400 的DNA 修复能力。四、讨论预期结果1. 本讨论将详细了解 Tip60 磷酸化在其活性中的作用。2. 本讨论将确定因 p400 的调控对 Tip60 活性和对 DNA 双链断裂修复的影响。3. 本讨论将揭示 Tip60 的磷酸化和 p400 的相互作用在 DNA 双链断裂修复途径中的作用。五、讨论进度安排1. 第一年: Tip60 磷酸化对基因表达和 p400 对 Tip60 的调节对DNA 双链断裂的影响的实验 1-2 个月。分析结果并完成论文初稿,4-6个月。2. 第二年: Tip60 活性等实验完成,3-6 周。数据整理、分析和论文修改,4-6 个月。3. 第三年: 与相关领域专家共同评案、论文修改和发表。开展进一步的讨论,或将讨论成果转化为应用。

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