精品文档---下载后可任意编辑Tip60 磷酸化和 p400 对 Tip60 活性及 DNA 双链断裂修复通路的调控的开题报告开题报告题目：Tip60 磷酸化和 p400 对 Tip60 活性及 DNA 双链断裂修复通路的调控一、讨论背景及意义Tip60 (Tat-interactive protein 60)，是一种高度保守的组蛋白乙酰转移酶，参加多种细胞生命活动，特别是对 DNA 修复、转录和细胞增殖等有重要作用。Tip60 能够促进 DNA 双链断裂修复途径，因此在维持基因组稳定性方面起着重要作用。尽管 Tip60 已经被广泛讨论，但其调控机制及调控因子并不清楚。目前已经有讨论发现 Tip60 能够被不同的 post-transcriptional modifications 调控，其中之一是磷酸化。磷酸化在许多细胞进程中发挥重要作用，因此 Tip60 的磷酸化可能会影响其活性。p400 是一种 ATP依赖性重组蛋白复合物，已经被证实能够调控 Tip60 酰化和染色质结构。p400 和 Tip60 的杂交复合物已经被证实与 DNA 锚定和修复有关，说明p400 与 Tip60 可能会协调修复 DNA 断裂。综上所述，Tip60 的磷酸化和与 p400 的相互作用可能会影响Tip60 的活性和对 DNA 双链断裂的修复，因此值得进一步讨论。二、讨论目的1. 确定 Tip60 磷酸化对其活性的效应。2. 探究 p400 如何影响 Tip60 的活性及其对 DNA 双链断裂的修复。3. 讨论 Tip60 的磷酸化和 p400 的相互作用对 DNA 双链断裂修复途径的影响。三、讨论方法1. 制备 Tip60 表达质粒，进行断裂修复功能的多种试验： 对Tip60、Tip60 磷酸化位点变异体和 p400 进行免疫共沉淀、蛋白质互作、荧光分子振荡共振能量转移和荧光共聚焦显微镜检测等。2. 通过免疫含量法和其他生化评估对 Tip60 的磷酸化进行定量分析。精品文档---下载后可任意编辑3. 在细胞系中使用 RNA 干扰或转形诱导抑制来检测 Tip60 和 p400蛋白质在 DNA 修复过程中的作用。4. 使用 DNA 链断裂恢复实验来评估 Tip60 及其变异体和 p400 的DNA 修复能力。四、讨论预期结果1. 本讨论将详细了解 Tip60 磷酸化在其活性中的作用。2. 本讨论将确定因 p400 的调控对 Tip60 活性和对 DNA 双链断裂修复的影响。3. 本讨论将揭示 Tip60 的磷酸化和 p400 的相互作用在 DNA 双链断裂修复途径中的作用。五、讨论进度安排1. 第一年： Tip60 磷酸化对基因表达和 p400 对 Tip60 的调节对DNA 双链断裂的影响的实验 1-2 个月。分析结果并完成论文初稿，4-6个月。2. 第二年： Tip60 活性等实验完成，3-6 周。数据整理、分析和论文修改，4-6 个月。3. 第三年： 与相关领域专家共同评案、论文修改和发表。开展进一步的讨论，或将讨论成果转化为应用。
