精品文档---下载后可任意编辑临床肿瘤标本中差异 miRNA 的检测及 mir-200b 功能讨论的开题报告一、讨论背景miRNA 是一类长度约为 22nt 的小分子 RNA,在转录后的基因表达与调控中扮演重要角色
一些讨论表明,miRNA 在肿瘤的发生、进展、转移和治疗中发挥着重要的作用
现有讨论认为,miRNA 的异常表达涉及到肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移、启动血管生成和避开凋亡等多个生物过程
针对不同肿瘤组织中差异表达的 miRNA,其在肿瘤发生与进展中的具体机制尚需进一步讨论
本讨论将选取临床肿瘤标本,检测其中的不同 miRNA,着重讨论 mir-200b 的功能与机制,为肿瘤早期诊断及治疗提供数据参考
二、讨论目的1
检测肿瘤组织标本中差异表达的 miRNA,并鉴定差异表达的miRNA 与肿瘤发生进展的关系
探讨 mir-200b 在肿瘤细胞中的表达水平与肿瘤的临床特征之间的关系,为肿瘤早期诊断与治疗提供新的数据支持
讨论 mir-200b 在肿瘤细胞中的功能,探讨其在肿瘤细胞增殖、侵袭、转移、血管生成及凋亡中的作用与机制
三、讨论内容及方法1
采集临床肿瘤标本及相应的控制标本
提取 RNA 和 miRNA,检测标本中差异表达的 miRNA,并制备不同 miRNA 的检测探针
制备 mir-200b 的 siRNA 和 overexpression 载体,并转染入肿瘤细胞
运用定量 PCR、Western blot、免疫荧光等技术分析肿瘤细胞中 mir-200b 的表达水平及其调控的分子机制
使用 MTT、Transwell、血管生成实验、TUNEL 等技术分析肿瘤细胞增殖、侵袭、转移、血管生成及凋亡的变化
四、讨论预期成果1
鉴定差异表达的 miRNA 与肿瘤发生进展的关系
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探讨 mir