精品文档---下载后可任意编辑乳腺癌耐药蛋白 BCRP 高表达细胞株的构建及黄酮类倾倒物逆转耐药性的讨论的开题报告题目：乳腺癌耐药蛋白 BCRP 高表达细胞株的构建及黄酮类倾倒物逆转耐药性的讨论一、讨论背景及意义：乳腺癌是女性主要的致死肿瘤之一，其发病率及死亡率逐年增加。目前，放疗、化疗和内分泌治疗等被广泛应用于治疗乳腺癌，但是乳腺癌耐药性震撼了治疗效果，成为了其治疗过程中的瓶颈。乳腺癌耐药机制很多，其中肿瘤细胞内药物转运蛋白是其中最重要的耐药机制之一，BCRP 即为其中一种。因此，这些细胞的建立对于讨论乳腺癌耐药性和寻找新的抗肿瘤治疗方法具有重要意义。二、讨论内容：1、构建 BCRP 高表达的乳腺癌细胞株：通过转染 BCRP 的噬血细胞中介的插入物质，可成功建立耐药的乳腺癌细胞株。2、讨论黄酮类倾倒物的逆转耐药性作用机制：黄酮类化合物已被证明是治疗乳腺癌的有效成分之一，而它们的作用机制还不十分清楚。本讨论将探讨黄酮类倾倒物是否减轻了 BCRP 导致的乳腺癌耐药性，并且通过重组 BRCR 蛋白、MIF 耐药启动子、MTT 和流式细胞分析等技术手段讨论黄酮类倾倒物的逆转耐药作用机制。三、讨论方法：1、进行人乳腺癌细胞株和噬血细胞的培育和准备工作。2、构建 BCRP 高表达的人乳腺癌细胞株：采纳改良版的冷冻载体转染法，将 pcDNA3.1-BCRP 质粒转染至人乳腺癌细胞株中。3、药物敏感性测定：通过 MTT 法检测药物敏感性。4、流式细胞分析：利用细胞表面标记物给药的方法，检测各组培育实验组细胞数量及结构。5、Western Blot 技术：通过 Western Blot 检测蛋白质水平。6、逆转耐药性实验：使用黄酮类倾倒物，检测其逆转 BCRP 导致的乳腺癌耐药性的作用机制。四、讨论预期结果：精品文档---下载后可任意编辑1、成功构建 BCRP 高表达的乳腺癌细胞株。2、黄酮类倾倒物可以增强死因程序的有减轻钙离子依赖的耐药性。3、明确现有抗耐药入药黄酮类化合物得到逆转了乳腺癌细胞中BCRP 导致的耐药性的作用机制。
