精品文档---下载后可任意编辑人巨细胞病毒通过 NF-κB 信号途径诱导人星形胶质细胞表达 IL-6 和 IL-8 的开题报告一、讨论背景人巨细胞病毒（Human cytomegalovirus，HCMV）是一种广泛存在于人类群体中的病毒，感染率在成人中可达 60%以上。尽管绝大多数人的感染不会引起明显的症状，但对于免疫系统不健全的人群（如新生儿和免疫缺陷者）可能会引起重症疾病。此外，一些讨论表明，HCMV 与多种疾病的发生和进展密切相关，例如乳腺癌、胃癌、肝癌等。然而，HCMV 感染的机制仍不十分清楚。星形胶质细胞是中枢神经系统中最丰富的神经胶质细胞，其在脑功能维持及促进神经损伤修复等方面发挥重要作用。IL-6 和 IL-8 是其产生的关键细胞因子，它们在免疫应答、炎症反应和细胞增殖中起着重要作用。一些讨论表明，HCMV 感染后可导致星形胶质细胞分泌细胞因子，但其机制仍不明确。因此，本讨论旨在探究 HCMV 感染通过 NF-κB 信号途径诱导人星形胶质细胞表达 IL-6 和 IL-8 的机制。二、讨论设计1.细胞培育人星形胶质细胞株 U373MG 将用于本讨论，细胞保存液将解冻后在37°C 下维持培育，新奇的细胞将于 3-4 天内更换一次培育基。2.病毒感染使用 HCMV 感染 U373MG 细胞，并设置对比组。感染后不同时相（2、8、24、48、72 h）收集细胞样品。3.载体转染使用 p65-siRNA 和空载体转染 U373MG 细胞，对转染后的细胞进行 HCMV 感染。设置空转染对比组和单独 siRNA 对比组。4.实时荧光定量 PCR使用实时荧光定量 PCR 检测 U373MG 细胞的 IL-6 和 IL-8 基因表达差异。5.ELISA精品文档---下载后可任意编辑使用 ELISA 检测 U373MG 细胞培育基中 IL-6 和 IL-8 的蛋白浓度。6. Western blot使用 Western blot 检测 U373MG 细胞中 NF-κB 的蛋白表达水平，以及 p65-siRNA 转染后的 U373MG 细胞中 NF-κB 的表达水平。7. 统计分析使用 SPSS 22.0 进行数据统计与图表绘制，采纳 t 检验分析各组间数据差异的显著性。三、预期结果在本讨论中，估计 HCMV 感染可显著诱导 U373MG 细胞产生 IL-6和 IL-8，同时增强 NF-κB 信号通路的激活。通过转染 p65-siRNA 去抑制该途径后，估计可显著减少 IL-6 和 IL-8 的表达，进一步证实 HCMV 感染通过 NF-κB 信号途径诱导人星形胶质细胞表达 IL-6 和 IL-8 的机制。
