植物组培培养基及其配制

1 植物组培培养基及其配制 培养基好比土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。因此，在组织培养基的各个环节中，应着重掌握培养基，了解它的组成和配制方法。 一、组成培养基的五类成分 目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。 1.无机营养物 无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子，在近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养基所需的钠和氯化物，由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即FeSO4与Na2— EDTA(螯合剂)的混合。 2.碳源 培养的植物组织或细胞，它们的光合作用较弱。因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起重要作用。 3.维生素 在培养基中加入 维生素，常有利 于 外植体的发育 。培养基中的维生素属 于 B族 维生素，其中效 果 最 佳 的有维生素 B1、维生素 B6、生物素、泛 酸钙和肌 醇 等。 4.有机附加物 包括人 工 合成或天 然 的有机附加物。最 常用的有酪 朊 水解物、酵 母 提取 物、椰 子汁 及各种 氨 基酸等。另 外，琼 脂 也是最 常用的有机附加物，它主要是作为培养基的支 持物，使培养基呈 固 体状 态，以利 于 各种 外植体的培养。 5.生长调节物质 常用的生长调节物质大致 包括以下 三 类： (1)植物生长素类。如 吲 哚 乙 酸(IAA)、萘 乙 酸(NAA)、2，4-二 氯苯 氧 乙 酸(2，4-D)。 (2)细胞分裂 素。如 玉 米 素(Zt)、6-苄 基嘌 呤 (6-BA 或 BAP)和激 动 素(Kt)。 (3)赤 霉 素。组织培养中使用的赤 霉 素只 有一种 ，即赤 霉 酸(GA3)。 二 、常用培养基配方及其特 点 1.常用培养基配方 组织培养是否 成功 ，在很 大程 度 上 取 决 于 对培养基的选 择 。不 同 培养基有不同 特 点 ，适 合于 不 同 的植物种 类和接 种 材料。开 展组织培养活 动 时 ，应对各种 培养基进 行 了解和分析 ，以便 能从 中选 择 ...