第八章 植物组织培养技术 一、基本概念 植物组织培养是指在无菌条件下，将离体的植物器官(如根尖、茎尖、叶、花、未成熟的果实、种子等)、组织(如形成层、花药组织、胚乳、皮层等)、细胞(如体细胞、生殖细胞等)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、原生质体(如脱壁后仍具有生活力的原生质体)，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱发产生愈伤组织，或潜伏芽等，或长成完整的植株，统称为植物组织培养。由于是在试管内培养，而且培养的是脱离植物母体的培养物，因此也称离体培养和试管培养，根据外植体来源和培养对象的不同，又分为植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、原生质体培养等。 二、培养方式 植物组织培养方式大致可分为固体培养和液体培养两类。 固体培养即将植物材料培养在加入一定量凝固剂的固体培养基上，最常用的凝固剂是琼脂，其用量为 6-10g/L，以不液化为原则（半固体）。用量太高，培养基过硬，培养材料感好，生长不好；用量太少，则培养基太软，材料在培养基中不稳定，甚至下沉，从而影响组织的呼吸。培养基的硬度还可能受到所用琼脂的质量、培养基 pH 及无机盐浓度的影响。固体培养基的优点是简便，只要具备培养室（箱）、接种室（箱）以及一般是实验室的玻璃皿就可以开展工作。其缺点是被培养的材料只有一部分表面能与培养基接触，因此与组织接触处的营养物质很快被吸收掉，而其他区域补充又来得较慢，形成了培养基中营养物质浓度差异，影响组织的生长速率。 液体培养即植物材料被培养在不加凝固剂的液体培养基中。液体培养基常用摇床或转床来振动培养容器，振动速度一般为 50-100 次／分。液体培养基中培养物是被培养基所包围，培养基中的营养物质分布均匀，不会出现浓度差异现象，同时培养物的供氧情况也得到改善，有利于它的代谢、生长。因此，在液体培养中，培养物的生长速度要比固体培养快得多。 三、培养基及配制 （一）培养基的成分 培养基是植物组织培养中离体植物材料赖以生存、生长发育的基地。培养基的合适与否是培养能否成功的关键因素之一。培养基的成分是根据被培养植物材料的生长发育所需要的营养而设计的。目前在植物组织培养中所采用的培养基成分除水（用蒸馏水）外，一般包括以下五大类： 1 、无机营养物 无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷...
