植物组织培养基及其配制 培养基好比土壤,是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地
因此,在组织培养基的各个环节中,应着重掌握培养基,了解它的组成和配制方法
一、组成培养基的五类成分 目前,大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的
无机营养物 无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成,大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供
钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势
而钙、钠、镁的需要则较少
培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供
微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁
培养基中的铁离子,大多以螯合铁的形式存在,即 FeSO4 与 Na2—EDTA(螯合剂)的混合
碳源 培养的植物组织或细胞,它们的光合作用较弱
因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要
培养基中的碳水化合物通常是蔗糖
蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起重要作用
维生素 在培养基中加入维生素,常有利于外植体的发育
培养基中的维生素属于 B 族维生素,其中效果最佳的有维生素 B1、维生素 B6、生物素、泛酸钙和肌醇等
有机附加物 包括人工合成或天然的有机附加物
最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等
另外,琼脂也是最常用的有机附加物,它主要是作为培养基的支持物,使培养基呈固体状态,以利于各种外植体的培养
生长调节物质 常用的生长调节物质大致包括以下三类: (1)植物生长素类
如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)
(2)细胞分裂素
如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA 或 BAP)和激动素(Kt)
(3)赤霉素