生物化学实验报告 姓 名： 学 号： 专业年级： 组 别： 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验名称 氨基酸的薄层层析 实验日期 2014-10-22 实验地点 第4实验室 合作者 指导老师 评分 教师签名 批改日期 一、实验目的 1. 掌握薄层层析法的一般原理。 2. 掌握氨基酸薄层层析法的基本操作技术。 3. 掌握如何根据移动速率（Rf值）来鉴定被分离的物质（即氨基酸混合液）。 二、实验原理 (一) 薄层层析 1.层析技术是利用化合物中各组分的物理性质（如溶解度、吸附能力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等）的不同，使各组分不同程度地分布在两相中，随着流动相从固定相上流过，不同组分以不同速度而最终被分离。 1) 特点：分离效率高，能分离各种性质相类似的物质。不仅可用于少量物质的分离纯化，也可用于大量物质的分离纯化和制备。 2) 固定相：固定相是层析的一个基质。包括固体物质（如吸附剂，凝胶，离子交换剂等）和液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液），这些物质能与相关的化合物进行可逆性的吸附、溶解和交换作用。 3) 流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质移动的液体、气体等，都称为流动相。柱层析中一般称为洗脱剂，薄层层析时称为展层剂。 4) 分类 （1）按两相所处状态，可分为液相层析和气相层析，前者以液体为流动相，后者以气体为流动相。 （2）按操作形式不同，可分为柱层析、薄层层析和纸层析。 （3）按层析的原理不同，可分为吸附层析、分配层析、凝胶层析、离子交换层析和亲和层析等。 今天要做的试验，根据原理属于吸附层析，根据操作形式又属于薄层层析，合到一起叫：吸附薄层层析。 2.薄层层析法是色谱分析技术的一种 一般是将固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。当液相（展开溶剂）在固定相上流动时，由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样，不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样，点在薄板上的混合氨基酸样品随着展开剂的移动速率也不同，因而可以彼此分开。（即通过吸附-解吸-再吸附-再解吸的反复进行，而将样品各组分分离开来） 3.硅胶吸附薄层层析 1) 吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶 : 硅胶：表达式为 SiO2·XH2O。层析用硅胶是一种多孔性物质，它的硅氧环交链结构表面上密布极性硅醇基（－Si－OH），这种极性的硅醇基能和许多化合物形成氢键而产生吸附. 2) 硅胶吸附薄层层析的特点： （1） 硅胶的吸附能力比氧化...
