试验一红细胞计数试验目的掌握红细胞计数原理及技术二

实验一红细胞计数一、实验目的：掌握红细胞计数原理及技术。二、实验原理：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算示得每升血液内的红细胞数。三、实验器材及试剂：显微镜、血红蛋白吸管、计数板、盖玻片、生理盐水。四、实验操作：1、取试管 1 支，加稀释液 3.98ml 或 1.99ml。2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血 10 微升。3、擦去管尖外部余血、轻轻注入红细胞稀释液底部，再吸取上层稀释液清洗吸管2-3 次，立即摇匀。4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。6、静止 2-3 分钟，待经红细胞下沉后，用高倍镜或低倍镜计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数。五、计算N（五个中方格内 RBC 数）X5X10X106X200=NX10I2个/升X5：表示 5 个中方格内 RBC 数换算为 1 个大方格内 RBC 数X10：1 个大方格容积、0.1ul、换算为 1ul 内 RBC 数X106：1ul 换算为 1 升内红细胞数X200：稀释倍数六、正常参考值正常参考值：成年男性：4.00-5.50X1012/升成年女性：3.50-5.00X1012/升新生儿：6.00-7.00X1012/升实验二血红蛋白测定一、实验目的：掌握氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。二、实验原理：血液在血红蛋白转化液中溶血后，除 SHb 外各种血红蛋白可被咼铁氰化钾氧化成咼铁血红蛋白，再与 CN"结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋（HicN）。HicN 最大吸收峰 540nm,最小吸收波谷 504nm,在特定的条件下，毫摩尔消光系数为44L.mmol-1.cm-1,因此根据标本的吸光度，即求得血红蛋白浓度。三、实验操作：1、取指血 20ul，加到 5ml 血红蛋白转化液中，混匀，静止 5 分钟。2、用分光光度计比色，波长 540nm，以蒸馏水或空白转化液调零，测定吸光度。3、用血红蛋白浓度为 50g/L、100g/L、150g/L、200g/L 在 721 型分光光度计上测定吸光度分别为 0.13，0.27，0.405，0.54.四、计算:血红蛋白（g/L）=测定管吸光度 X367.7正常参考值：成年男性：120-160g/L成年女性：110-150g/L新生儿：170-220g/L实验三白细胞计数一、实验目的：掌握白细胞计数显微镜计数法原理及技术。二、实验原理：用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞，混匀后充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经过换算求得每升血液内的白细胞数。三、实验器材及试剂：显微镜、微量吸管、计数板、盖玻片、白细胞...