第36章RNA的生物合成及调控VIP专享

第三十六章 RNA 的生物合成及调控 第一节 DNA 指导下RNA 的合成 一、D N A 指导的R N A 聚合酶 原核生物的RNA聚合酶由α 2β β ′构成核心酶，σ 为起始因子，σ 因子引导RNA聚合酶稳定地结合到DNA的启动子上，不同的菌种σ 因子的大小差别很大,不同的σ 因子可以识别不同的启动子，β 亚基借助疏水作用与DNA结合,β ′亚基是碱性蛋白，借助静电作用与DNA结合，β β ′构成RNA聚合酶的催化中心，α 亚基与启动子上游元件和活化因子结合，促进酶的装配，ρ 因子参与某些基因转录的终止。 真核生物的RNA聚合酶Ⅰ对α -鹅膏蕈碱不敏感，转录45S rRNA前体，经加工产生5.8S rRNA，18S rRNA 和28S rRNA； RNA聚合酶Ⅱ对α -鹅膏蕈碱敏感，转录编码蛋白质的基因和大多数snRNA；RNA聚合酶Ⅲ 对α -鹅膏蕈碱中等敏感，转录小RNA，包括tRNA，5S rRNA， snRNA和scRNA 。 转录的步骤 研究转录起点的方法：足迹法 二、启动子和转录因子 原核生物的启动 真核生物RNA聚合酶Ⅱ启动子的共有序列 RNA聚合酶Ⅱ基本启动子的共有序列TATA位于-25至 -30，转录起始部位有一保守序列PyPyA*NT（A）PyPy, 其中的Py表示嘧啶，*表示+1位点。上游调控元件包括CAAT框，GC框和八聚体框等，位置不很确定，不同的细胞可以有不同的上游调控元件，不同的上游调控元件与不同的转录因子相互作用（表36-4）。 真核生物RNA聚合酶Ⅱ启动子与转录因子的相互作用 TFⅡD是包含TATA结合蛋白（TATA-binding protein,TBP）和多种TBP联结因子（TBP-associated factor,TAF）的寡聚蛋白，可以与RNA聚合酶Ⅱ的C端相互作用。 TFⅡB有两个结构域，一个结合TBP。另一个可以引进TFⅡF/polⅡ复合物。 TFⅡF有ATP酶，解螺旋酶，激酶等多种活性，可以使RNA聚合酶Ⅱ大亚基的C端磷酸化，引起构像变化，促进转录。还可以参与DNA损伤的修复。 黄色为TATA box的糖磷酸骨架，碱基对为红色，相邻的DNA片段为蓝色，马鞍形的TBP（绿色）结合在DNA的小沟，使小沟扩大，并使DNA轴弯曲约100o，使TATA序列解旋。TFⅡD杂聚体的其它组分位于TBP上方，像骑在马鞍上的牛仔。所有真核生物的基因均依赖于TBP。 ⅡE和ⅡH促进除ⅡF以外的其他转录因子脱落，使转录由起始阶段进入延伸阶段。 前起始复合物的结构。显示polⅡ，TATA box，TBP，TFⅡB（B），TFⅡE（E）的相对位置。转录起始于polⅡ和TFⅡE环绕的区域。 电脑构建的TFⅡA-TBP-TFⅡB复合物的结构。注意蛋白...