胡萝卜愈伤组织培养

验名称 胡萝卜的愈伤组织诱导培养 实验时间 4 月至6 月 小组合作： 是○√ 否○ 一、实验预习 1 、实验目的： 1.1通过本次实验，能够熟练准确配制培养基，并能根据实验目的设计适合的培养基配方。 1.2熟练掌握外植体的表面消毒技术和无菌操作技术，同时能设计和配制胡萝卜伤组织增殖培养基。 1.3熟练掌握愈伤组织继代培养的基本操作技术，进一步熟悉、规范无菌操作技术；设计和配制胡萝卜细胞悬浮培养的培养基。 2、实验准备： 2.1 MS母液培养基的配置 主要实验用具和仪器： 电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。 药品： NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、 MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、 ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、 CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、 Na2-EDTA·2H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素 B6)、盐酸硫胺素 (维生素 B1)、甘氨酸。 2.2胡萝卜愈伤组织诱导培养培养基的配置 主要实验用具和仪器： 冰箱、普通天平、三角瓶、移液管、量筒、烧杯、容量瓶、玻璃棒、医用口杯、精密 pH试纸（pH5.4~7.0）、药勺、称量纸、标签纸、封口膜、橡皮筋、电炉、高压蒸汽灭菌锅等。 药品和试剂： MS培养基母液、琼脂、蔗糖、生长调节物质、蒸馏水、1mol·L-1HCl、1mol·L-1NaOH 2.3胡萝卜愈伤组织诱导 主要实验用具和仪器： 100ml三角瓶、500ml搪瓷杯、25ml量筒、10ml和5ml吸管、pH试纸（5.4~7.0）、封口膜、扎口用棉线、药勺、称量纸、酒精棉球、小块纱布、已灭菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯等。 1 药品和试剂： MS基本培养基母液、愈伤组织诱导培养基、蒸馏水、无菌水、75％酒精、蔗糖琼脂、NAA、6-BA、水解酪蛋白、1mol/LHCl、1mol/LNaOH、0.1%HgCl2。 实验材料： 胡萝卜肉质质根（贮藏根） 2.4 胡萝卜愈伤组织的继代培养 主要实验用具和仪器： 酒精棉球、小块纱布、已灭菌培养皿和滤纸、枪状镊子、眼科手术剪、手术刀、酒精灯、 100ml三角瓶、500或 1000ml搪瓷杯、50ml量筒、1ml、2ml、5ml、10ml吸管、精密 pH试纸（5.4~7.0）、封口膜、橡皮圈、药勺、称量纸等。 药品和试剂： 愈伤组织继代培养基、75％酒精、MS培养基和常用试剂母液、蒸馏水。 实验材料： 处于脱分化进程中的外植体。 3、实验原理： 配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准...