专题 1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外 DNA 重组和转基因技术 ,赋予生物以新的遗传特性,发明出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
基因工程是在 DNA 分子水平 上进行设计和施工的,又叫做 DNA 重组技术
操作水平 :分子 原理:基因重组(一)基因工程的基本工具1
“分子手术刀”--限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:重要是从原核生物中分离纯化出来的
(2)功能:可以识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性
(3)成果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端一般有两种形式:黏性末端和平末端
“分子缝合针"-—DNA 连接酶 (1)两种 DNA 连接酶(E·coliDNA 连接酶和 T4—DNA 连接酶)的比较:① 相似点:都缝合磷酸二酯键
② 区别:E·coliDNA 连接酶来源于 T4 噬菌体,只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低
(2)与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键
DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段 的末端,形成磷酸二酯键
“分子运送车"——载体(1)载体具有的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保留
② 具有一至多种限制酶切点,供外源 DNA 片段插入
③ 具有标识基因,供重组 DNA 的鉴定和选择
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、构造简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子
(3)其他载体: 噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序一基因的构造:基因是有遗传效应的 DNA 片段(注:RNA