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登革热实验室检测指南

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附件 2登革热实验室检测指南一、目的(一)及时发现、诊断病例。(二)及时了解伊蚊媒介携带登革病毒状况。(三)病毒分型和溯源。(四)为登革热流行趋势的预测、预警和制定防治对策、措施提供科学依据。二、检测对象(一)疑似和临床诊断病例(根据登革热诊断标准 WS216-2024)。(二)伊蚊成蚊和幼虫。三、样本采集、保存和运输(一)临床标本采集用无菌真空干燥管,采集患者非抗凝血,及时分离血清,分装 2 份,保存于带螺旋盖、内有垫圈的冻存管内,标记清楚后低温保存,其中 1 份用于现场实验室检测,1 份用于上级预防控制机构复核(附件 1,附表 1)。1.登革热临床诊断病例及疑似病例,每次采集血液标本 5mL。 2。登革热临床诊断和疑似的住院病例(包括初筛阴性),应采集双份血液标本,入院当天和出院前 1 天各一份。3。疫点首发病例,必要时应采集第二份血标本,距第一份血样采集日期间隔在 7 天以上.(二)蚊媒标本采集疫点内采集的伊蚊成蚊及幼虫,分类鉴定后,填写媒介标本采集信息表,根据采集地点分装,每管 10—20 只。(三)标本保存、运送标本应-70℃以下保存,血液标本可-20℃以下保存,但不超过 1 周.标本运送时采纳低温冷藏运输,避开冻融,样本运输应遵守国家相关生物安全规定。四、检测内容(一)实验室检测登革热疑似病例发生所在地医院和/或县(市)疾控机构采集病例血清,检测登革病毒抗原、核酸或抗体,检测流程参见图 1。(二)复核检测1。送市或省级疾病预防控制机构的临床标本,抽样 30%进行复核检测,疫点首发病例需采纳病原学和/或双份标本血清学方法复核检测,暴发疫情复核检测不少于 5 例,疫情少于 5 例者应全部检测,病毒核酸阳性标本应分型检测。2。疫点首发病例,重症病例、输入病例急性期标本应采纳 PCR 方法进行分型检测,阳性者分离病毒,从临床标本或所分离病毒中扩增 E 蛋白编码基因,完成序列分析。3.每次暴发疫情应开展病毒全基因组序列分析。4。实验室检测阴性临床病例以及重症病例,应对恢复期血清进行 IgM、IgG 抗体和/或中和抗体检测。(三)媒介标本检测1。核酸检测捕获的伊蚊成蚊或幼虫,进行核酸分型检测,并扩增病毒 E 蛋白编码基因,完成序列分析。2。病毒分离病毒核酸阳性的标本由国家、省或有条件的市级疾病预防控制机构进行病毒分离、基因组序列分析.图 1 登革热疑似病例实验室检测流程五、实验室检测方法(一)临床标本检测1、病原学检测病原学检测主要适用于急...

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