姜黄素姜黄素 1 材料 动物 SPF 级 SD 大鼠，雌雄各半，体重g，购自广州中医药大学实验动物中心，普通大鼠饲料喂养。 药物姜黄素、大黄素，均购自陕西旭煌植物科技有限公司，经 HPLC 检测纯度达90%以上，使用前用%羧甲基纤维素钠配制成不同浓度的混悬液。水飞蓟素，德国马博士大药厂生产，临用时用蒸馏水配成/ml的供试品液。 试剂 DMN 购自日本株式会社，使用前用生理盐水配成%溶液备用。HA，LN，PCIII 由北京北方生物技术讨论所提供；TNF-α 测试盒由北方生物试剂讨论所提供；SOD，MDA，Hyp，考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒由南京建成生物工程讨论所提供。甲醛、苏木素、伊红、酸性品红、戊二醛等。 仪器 7060 型全自动生化分析仪、SN-695B 型放免 γ 测量仪，上海原子核讨论所日环仪器厂。UV-754 型分光光度计，BX50显微镜，Olympus 公司，2035 石蜡切片机，德国 Walldorf 公司；E990 数码摄像机，Nikon 公司。 2 方法 分组、造模及给药随机取 SD 大鼠 8 只为正常对比组。其它大鼠进行造模。将1mlDMN 原液溶于 200ml 生理盐水中，配制%DMN 溶液，避光保存，2 周内使用。参照文献［2］给药，每只大鼠给予%DMN 腹腔注射，第 1 周前 3d 连续给 2/3 药量，后 4d不给药，第 2 周开始前 3d 连续给全药量，后 4 天不给药，持续 4 周。正常对比组则给予相同量的生理盐水腹腔注射。造模结束后，将存活的大鼠随机分为 6 组，分别为模型对比组、水飞蓟素组、姜黄素高、低剂量组和姜大联用高、低剂量组,每组 8 只。正常对比组和模型对比组灌胃蒸馏水，水飞蓟素组用药量分别为人临床剂量的 5 倍，即/kg，姜黄素给药剂量为 100mg/kg 和200mg/kg，姜大联用剂量分别为 50，10 和100，20mg/kg。灌胃 1 次/d，每周灌 6d。治疗 4 周后，实验结束。眼眶采血，分离血清，留取肝左叶固定。 观察指标及方法①观察大鼠一般状态包括：饮食变化、行为及毛发改变等；②全自动生化分析仪检测大鼠血清ALT，AST，TP，ALB，A/G；③放免法检测HA，LN，PCIII，TNF-α 含量；④肝组织标本 HE 和 VG 胶原染色，光镜观察；⑤ α-SMA 免疫组化染色：常规 SABC 法染色，DAB显色。 肝胶原增生程度、肝纤维化分级采纳Ishak 法［3］0 级：无肝纤维化；1 级：纤维组织向部分汇管区扩大，伴有小纤维间隔；2 级：纤维组织向大部分汇管区扩大，并伴有小纤维间隔；3 级：纤维组织向汇管区扩大，并伴汇管区与...
