应用响应面法优化软枣猕猴桃的一步成苗培养基

应用响应面法优化软枣猕猴桃的一步成苗培育基农业大学园艺学院实验室进行讨论。1.2 试验方法1.2.1 外植体的灭菌处理将外植体用洗洁精洗净灰尘，再用流水冲洗 1h。放在超净工作台的滤纸上吸干水分，放入灭菌后的烧杯中。加 75%乙醇消毒 30，用蒸馏水清洗 4 次，加 0.1%三氯甲烷消毒 6min，用蒸馏水冲洗 5 次。消毒期间不断振荡，使试剂与材料充分接触。1.2.2 单因素试验[HJ1.4mm]为探究每种生长激素的不同浓度对外植体产生的影响，以 MS 为基本培育基，将 6-BA、IBA、NAA 分别设置 5 种浓度：6-BA（1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mg/L）;NAA（0.05、0.10、0.20、0.40、0.80mg/L）;IBA（0.05、0.10、0.20、0.40、0.80mg/L）。将外植体分别接种到培育基内，每个处理接 15 个茎段，培育周期为 50d。[CM（26]1.2.3 软枣猕猴桃一步成苗培育基的优化在单因素试验的基础上，用响应面分析法，根据 Bo 某-Behnken 的中心组合试验设计原理，以 6-BA、NAA、IBA 浓度为试验因子，植株再生频率为响应值，进行 3 因素 3 水平的试验设计，结果见表 1，每个水平处理10 个茎段，培育周期为 50d。1.2.4 培育条件基础培育基为 MS 培育基，加入蔗糖 30g/L、琼脂粉 8g/L，pH 值 5.8～6.0。培育环境为：温度（25±2）℃，光照度 2000l 某，每天光照14h。1.2.5 数据分析采纳 Deign-E 某 pert8.0.6 软件对数据进行分析。诱导率=出不定芽的外植体/接种的外植体数某 100%;植株再生频率=再生植株总数/接种的外植体数。2 结果与分析2.1 单因素试验结果2.1.1 不同 6-BA 浓度对外植体的影响6-BA 是一种常用的细胞分裂素，对细胞生长分化有良好的促进作用。外植体接种 15d 左右，有嫩绿色芽点产生，逐渐长大成为不定芽，30d 后部分不定芽会增殖出多个不定芽，当 6-BA 浓度为10、2.0、3.0mg/L 时，诱导率和增殖效果较好。当 6-BA 浓度为 4.0mg/L时，诱导率和再生频率都有所下降，可见浓度过高的 6-BA 对外植体生长分化有抑制作用。50d 后，有部分不定芽长出须根，6-BA 浓度为 2.0mg/L时，生根率较好，植株再生频率最高。2.1.2 不同 NAA 浓度对外植体的影响由表 3 可知，低浓度的 NAA 对诱导与增殖的效果都很差，在 NAA 浓度大于 0.10mg/L 时，诱导速度慢，25d 后才有不定芽形成，形成的不定芽少。在 NAA 浓度为 0.20，0.40mg/L 时，20d 后即可诱导出不定芽，且 30d后增殖的不定芽较多;NAA 浓度为...