重点实验课观察根尖分生组织细胞的有丝分裂[配有演示视频 见课件光盘] 一、实验原理(1)植物的分生组织细胞有丝分裂较为旺盛。(2)有丝分裂各个时期细胞内染色体行为变化不同,根据各个时期内染色体的变化情况,识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。(3)细胞核内的染色体(质)易被碱性染料染色。二、操作流程过程操作步骤说明根尖培养实验前 3~4 d,将洋葱放在广口杯上,底部接触清水,放置温暖处,常换水,待根长约 5 cm 时取用生长健壮的根尖制作临时装片装片制作取材剪取根尖 2 ~ 3 mm(注意取材时间)解离解离液:质量分数为 15% 的盐酸 和体积分数为 95% 的酒 精按 1∶1 体积比混合时间:3~5 min目的:使组织中的细胞相互分离开来漂洗漂洗液:清水时间:约 10 min目的:洗去解离液,防止解离过度,影响染色染色染色液:0.01 g/mL 的龙胆紫溶液或 0.02 g/mL 的醋酸洋红溶液时间:3~5 min目的:使染色体(或染色质)染色制片用镊子将处理过的根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片,然后用拇指轻轻地按压载玻片观察先低倍镜观察:找到分生区细胞(方形、排列紧密)后高倍镜观察:找出各时期细胞,观察特点并记录各时期的细胞数目绘图中期细胞绘图要点:植物细胞形态近方形、着丝点排列在赤道板上;有染色单体、纺锤体;无核膜、核仁和中心体三、疑难点拨(1)选材时,需选分裂期在细胞周期中所占比例大的植物品种,剪取根尖时不宜过长,保证选取的是分生区细胞。(2)解离时间要严格控制,解离时间不能太短,否则细胞间果胶未溶解,压片时细胞不易分散,达不到效果;时间过长则细胞分离过度、过于酥软,无法取出根尖进行染色和制片。(3)控制染色时间,染色时间不能太短,否则染色体或染色质不能完全着色;时间过长则使细胞核等其他部分充满染色剂无法分辨染色体。(4)压片时用力必须恰当,过重时会将组织压烂,过轻则细胞未分散,二者都影响观察效果。(5)对细胞有丝分裂的过程观察不可能看到连续的分裂过程,因为在解离过程中细胞已经死亡,观察到的只是一个固定的时期,要不断地移动装片,在不同的视野中找到各个时期的分裂图像,所以在制作装片时要让细胞分散成一层细胞,这样才能找到各个分裂时期的细胞。[典例] 在完成了观察洋葱根尖分生区细胞有丝分裂实验后,教师给学生提供了 2 份资料。资料一 一份“实验报告”的部分内容(一)解离:剪取洋葱根尖 5 cm,放入...