专题五DNA和蛋白质技术

专题 5 DNA 和蛋白质技术【课题目标】本课题通过尝试对植物或动物组织中的 DNA 进行粗提取，了解 DNA 的物理化学性质，理解DNA 粗提取以及 DNA 鉴定的原理。【课题重点与难点】课题重点：DNA 的粗提取和鉴定方法。课题难点：DNA 的粗提取和鉴定方法。【知识要点】1.DNA 的物理化学性质，尤其是 DNA 的溶解性；2. 2.二苯胺法鉴定 DNA 的方法和原理。[学习导航]DNA 和蛋白质技术，包括 DNA 的提取、蛋白质的提取、DNA 片段的扩增等，是开展分子生物学研究的基本技术。本专题将从基础入手，学习 DNA 的粗提取、PCR 技术和血红蛋白的提纯。学习这些技术，不仅能够帮助学生初步了解分子生物学的基本实验方法，而且能够巩固必修课中学习的有关 DNA 和蛋白质的理论知识。本专题的 3 个课题相对独立，没有严格的先后顺序。课题 1 的操作难度不高，学生比较容易获得结果。课题 2 的操作难度也不高，但 PCR 技术的原理是难点，学生要充分利用教材的图文资料，并且在教师的引导下进行实验操作。课题 3 的操作难度比较大，所以学生一定要在教师的精心指导下完成操作。课题 1 DNA 的粗提取与鉴定[导学诱思]1．提取 DNA 的方法提取生物大分子的基本思路是 。对于 DNA 的粗提取而言，就是要利用 、 等在物理和化学性质方面的差异，提取 DNA，去除其他成分。1）DNA 的溶解性 DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 图 5—1 是 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲线，请根据曲线图，思考：① 在什么浓度下，DNA 的溶解度最小？DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度是如何变化的？② 如何通过控制 NaCl 溶液的浓度使 DNA 在盐溶液中溶解或析出？此外，DNA 不溶于 溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将 DNA 与蛋白质进一步的分离。2）DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解 ，但是对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 60—80oC 的高温，而 DNA 在 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ，但对 DNA 没有影响。3）DNA 的鉴定 在 条件下，DNA 遇 会被染成 色，因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。2．实验设计1）实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑，但是使用 的生物组织，成功的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的实验材料：鱼卵...