实验一：紫外-可见吸收光谱一、实验目得1. 熟悉与掌握紫外-可见吸收光谱得使用方法2. 用紫外-可见吸收光谱测定某一位置样品浓度3. 定性推断与分析溶液中所含物质种类二、实验原理紫外吸收光谱得波长范围在 200~400，可见光吸收光谱得波长在400~800，两者都属于电子能谱，两者都可以用朗伯比尔（Lamber-Beer’s Law）定律来描述A=ε bc其中 A 为吸光度;ε 为光被吸收得比例系数；c 为吸光物质得浓度,单位mol/L；b 为吸收层厚度，单位 cm 有机化合物得紫外-可见吸收光谱，就是其分子中外层价电子跃迁得结果，其中包括有形成单键得 σ电子、有形成双键得 π 电子、有未成键得孤对 n 电子。外层电子吸收紫外或者可见辐射后，就从基态向激发态（反键轨道）跃迁。主要有四种跃迁，所需 能 量 ΔE 大 小 顺 序 为σ→σ*>n→σ*>π→π>n→π*吸收带特征典型基团 σ→σ* 主要发生在远紫外区C-C、C-H（在紫外光区观测不到）n→σ* 跃迁一般发生在 150~250nm，因此在紫外区不易观察到-OH、-NH 2 、-X、-Sπ→π* 跃迁吸收带 波长较长，孤立跃迁一般发生在 200nm 左右芳香环n→π* 跃迁一般发生在近紫外区（200~400nm）C=O、C=S、－N=O、－N=N－、C=N ;三、实验步骤1、开机打开紫外-可见分光光度计开关→开电脑→软件→联接→M（光谱方法）进行调节实验需要得参数：波长范围 700-365nm扫描速度 高速；采样间隔： 0、5nm2、甲基紫得测定（1）校准基线 将空白样品（水）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准（2）标准曲线得测定 分别将 5ug/ml、 10ug/ml 、15ug/ml 、20ug/ml 甲基紫溶液移入比色皿（大约 2/3 处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存（3）测定试样将试样甲基紫溶液移入比色皿（大约 2/3 处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存3、甲基红得测定（1）校准基线 将空白样品（乙醇）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准（2）测定试样将试样甲基紫溶液移入比色皿（大约 2/3 处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存四、实验结果1、未知浓度得测定分别测定了 5μg/ml，10μg/ml，15μg/ml，20μg/ml 与未知浓度得甲基紫溶液得紫外吸收光谱，紫外吸收谱图如下：甲基紫在 580nm 就是达到最大吸收见下表：浓度/μg*ml-1吸光度50、665101、274152、048202、659未知0、732各浓度在 580nm 得吸光度数据做成散点，结果显示，能很好得拟...
