流式细胞仪操作规程-SOPVIP专享

流式细胞仪操作规程目录1:淋巴细胞亚群测定及绝对计数2：活化淋巴细胞亚群、记忆 T 及纯真 T 得检测3：HLA—B27 测定4:C Ｄ 55/C Ｄ 59 测定5：干细胞检测与绝对计数6：白血病免疫分型测定7:淋巴细胞 T 细胞亚群细胞内因子 IFN－γ/IL—4 测定８:细胞周期分析９:活化血小板检测10:血小板抗体测定11:红细胞抗体测定１ 2:粒细胞抗体测定淋巴细胞亚群测定（流式细胞仪） 医院检验科操作规程文件号:200 年 月 日起实施第 1 版(共 3 页) 本规程每 2 年复审一次 复审日期: 年 月 日 复审人: 规程编写者: 审 批 者： 批准日期： 年 月 日 文件分发部门与／或个人 院档案室保管者: 检验科 主任: 检验科 实验室： 淋巴细胞亚群测定方法 流式细胞仪（Be ｃ kmanCo ｕ lte ｒ，贝克曼库尔特)原理： 双/三色/四色直接免疫荧光法。荧光素标记得各种单克隆抗体加入到全血中,与白细胞膜上相应得抗原结合，经过溶血、洗涤(与固定)等步骤后,在流式细胞仪上进行分析，从而得到淋巴细胞亚群得百分数，加入 Flow—Ｃ ount 即可得出绝对计数.淋巴细胞表面抗原分布如下:T 淋巴细胞:CD ３＋;B 淋巴细胞:CD3—，ＣＤ l9+；辅助性 T 淋巴细胞：Ｃ D3＋C Ｄ４+；抑制性 T 淋巴细胞：CD3+C Ｄ８+；NK 细胞：CD3—CDl ６+５ 6＋等.根据淋巴细胞膜上 CD 分子表达得不同,流式细胞仪可以分辨出淋巴细胞及其各种不同得亚群，利用计算机软件计算出淋巴细胞亚群得百分数，加入 F ｌ ow-Count 组会自动得出绝对计数。标本采集与处理 受检者得准备 检查对象生活饮食处于日常状态。 采集部位 静脉采血抗凝剂 E ＤＴ A 或肝素抗凝血 要求 1.样本量 1 ｍ l. 2．样本应在采集后 6 小时内处理，冷冻或溶血得标本不能用。 3．样本白细胞计数应在４、0-10、0×1 ０ 9/L 之间。若〉10、０×109/L, 样本需要稀释,用ＰＢＳ稀释;若<4、0×109/L，应分离单个核细胞。 试剂 品牌 剂型 规格 贮存 贝克曼库尔特成分 1:单克隆抗体 液体 2-8℃ （C Ｄ 45/４/8／3 No、6607 ０ 13 CD ４ 5／５６/1 ９/３ Nｏ、660 ７ 0 ７３ CD ４/8/3 No、IM1650 同型对比 IgG1/IgG1/Ｉ gG1 No、IM1672 CD ３/１ 9 Ｎ o、I Ｍ 1293 CD3/16＋56 No、Ｉ M20 ７ 6 CD19-PC5 No、Ｉ M ２ 643Ｆ lo ｗ－Coun ｔ荧光微球 Ｎ o、) ２：全血溶血试剂（Q－Prep) 液体(No...