流式细胞仪得原理及其临床应用作者: zfy5956 ( 站内联系 TA) 发布: 2025-05-11流式细胞技术(FCM)就是 70 年代进展起来得一种快速对单细胞定量分析得新技术,它借簦了荧光显微镜技术,同时利用与荧光染料,激光技术,单抗技术以及计算机技术得进展,将荧光显微镜得激发光源改为激光,使之具有更好得单色性与激发效率,因而大大提高了检测灵敏度,同时将固定得标本台改为流动得单细胞悬液,用计算机进行数据处理,因而大大提高了检测速度与统计精确性,而且从同一个细胞中可以同时测得多种参数,为生物医学与临床检验学进展提供了一个全新得视角与强有力得手段、目前,该技术已经广泛用于基础讨论与临床应用,在免疫学,遗传学,血液学,肿瘤学等领域内发挥前重要得作用、本文着重介绍流式细胞仪基本原理及其在临床上得应用、一、基本原理 流式细胞仪得主要结构可以大致分为这样几个组成部分:激光系统,流式系统,信号处理及放大,计算机系统、图一,图二概括了流式细胞仪得基本原理,当待测标本被制务成单细胞悬液,经染色后进入流动室,流动室内充满流动得鞘液,鞘液压力与样品流压力就是不同得,当二者得压力差异达到一定程度时,鞘液裹挟着得样品流中细胞排成单列逐个经过激光聚焦区、假如我们将细胞中感兴趣得部分特异性地标上荧光染料,那么这些染料将在细胞通过激光检测区时受激发出特定波长得荧光,通过一些波长选择通逶性得滤色片,我们可以将不同波长得散射光,荧光信号区分开来,并送到不同得光电配增管中,经过一系列信号转换,放大,数字化处理,我们就可以在计算机上直观地统计染上各种荧光染料得细胞各自得百分率、选择不同得单克隆抗体及荧光染料,我们可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上得多个不同得特征,假如对具有某种特征得细胞有兴趣,我们还可以利用流式得分选功能将其分选出来,以便于进一步培育,讨论二、流式细胞仪在免疫学中得应用1、 淋巴细胞亚群分析淋巴细胞就是正常机体免疫系统功能最重要得一大细胞群,在免疫应答过程中,未梢血淋巴细胞发育成为功能不同得亚群、各亚群得数量与功能了生异常时,就能导致机体免疫紊乱并产生病理变化、FCM 可以同时检测一种或几种淋巴细胞细胞表面抗原,将不同得淋巴细胞亚群数量得测定来监控病人得免疫状态,指导治疗、2、 感染及其治疗效果观察由于 T 淋巴细胞在人体免疫系统中承担着重要得功能,因此,当感染发生时,T 淋巴细胞各亚群得变化往往能很敏感地反映感染得状态与程度、例如,细胞膜外CD4 分子有 HIV ...
