常见大肠杆菌感受态的特点和用途

常见大肠杆菌感受态的特点和用途(3 页)Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。1：DH5a 菌株DH5a 是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a 在使用 pUC 系列质粒载体转化时，可与载体编码的 β－半乳糖苷酶氨基端实现 α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体（如 pET 系列）的基因。T7 噬菌体 RNA 聚合酶位于 λ 噬菌体 DE3 区，该区整合于 BL21 的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS 菌株该菌株含有质粒 pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS 含有表达 T7 溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109 菌株该菌株在使用 pUC 系列质粒载体进行 DNA 转化或用 M13 phage 载体进行转染时，由于载体 DNA 产生的 LacZa 多肽和 JM09 编码的 LacZΔM15 进行 α－互补，从而显示 β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10 菌株该菌株适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)， φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74， recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG6：HB101 菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1 7：M110 或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有 Dam 甲基化酶和 Dcm 甲基化酶，前者可以在 GATC 序列中腺嘌呤 N-6 位上引入甲基，后者在 CCA/TGC 序列的第一个胞嘧啶 C-5 位置上引入甲基。 常用的菌株都会产生dam,dcm，从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的 DNA 不能切割，如 FbaI 和 MboI 等，一般生物公司提供的内...