食品中苯甲酸、山梨酸与糖精钠得测定 高效液相色谱法2、1 原理 不同样品经提取后,将提取液过滤,经反相高效液相色谱分离测定,根据保留时间定性,外标峰面积定量。2、2 试剂与材料除另有说明外,所用试剂均为分析纯,实验用水符合 GB/T 6682 要求。2、2、1 甲醇:色谱纯。2、2、2 乙酸铵溶液:称取 1、54g 乙酸铵,加水溶解并稀释至 1000mL,经微孔滤膜过滤。2、2、3 亚铁氰化钾溶液:称取 106g 亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O]加水至1000mL。2、2、4 乙酸锌溶液:称取 220g 乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]溶于少量水中,加入 30mL 冰醋酸,加水稀释至 1000mL。2、2、5 氨水(1+1):氨水与水等体积混合。2、2、6 正己烷。2、2、7 pH4、4 乙酸盐缓冲溶液:a) 乙 酸 钠 溶 液 : 称 取 6 、 80g 乙 酸 钠 (CH3COONa·3H2O), 用 水 溶 解 后 定 容 至1000mL。b)乙酸溶液:称取 4、3mL 冰乙酸,用水稀释至 1000mL。将上述两种溶液按体积比 37:63 混合,即得 pH4、4 乙酸盐缓冲溶液。2、2、8 pH7、2 磷酸盐缓冲溶液: a)称取 23、88g 磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),用水溶解后定容至 1000mL。 b)称取 9、07g 磷酸二氢钾(KH2PO4),用水溶解后定容至 1000mL。将上述两种磷酸盐溶液按体积比 7:3 混合,即得 pH7、2 磷酸盐缓冲液。2、2、9 标准溶液得配制: a)苯甲酸标准储备液:准确称取 0、2360g 苯甲酸钠,加水溶解并定容至200mL。此溶液每毫升相当于含苯甲酸 1、00mg。 b)山梨酸标准储备液:准确称取 0、2680g 山梨酸钾,加水溶解并定容至200mL。此溶液每毫升相当于含山梨酸 1、00mg。 c)糖精钠标准储备液:准确称取 0、1702g 糖精钠(C6H4CONNaSO2)(120℃烘干4h),加水溶解并定容至 200mL。此溶液中糖精钠得含量为 1、00g/mL。 d)混合标准使用液:分别准确吸取不同体积苯甲酸、山梨酸与糖精钠标准储备 溶 液 , 将 其 稀 释 成 苯 甲 酸 、 山 梨 酸 与 糖 精 钠 含 量 分 别 为 0 、 000mg/mL、0、020mg/mL、0、040mg/mL、0、080mg/mL、0、160mg/mL、0、320mg/mL得混合标准使用液。2、2、10 微孔滤膜:0、45μm,水相。2、3 仪器与设备2、3、1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器。2、3、2 离心机:转速不低于 4000r/min2、3、3 超声波水浴振荡器。2、3、4 食品粉碎机。2、3、5 旋涡混合器。2、3、6 pH 计。2、3、7 天平:分度值为 0、01g 与 0、1mg。2、4 分析步骤2、4...
