生物技术在其他方面的应用考点一 血红蛋白的提取和分离1．血红蛋白的提取和分离原理及方法(1)原理：利用蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，来分离不同种类的蛋白质。(2)分离方法① 凝胶色谱法：也称做分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。② 电泳法：电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。常用的电泳法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。2．实验操作程序[基础自测]1．判断下列叙述的正误(1)利用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量小的先洗脱出来(×)(2)在电泳过程中，蛋白质分子的移动速度，与分子本身的大小和形状无关，而与所带电荷的差异有关(×)(3)在 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中，电泳迁移率完全取决于分子的大小(√)(4)红细胞的洗涤次数不能过少，否则无法除去血浆蛋白；要低速、短时离心，否则会使白细胞等一同沉淀，达不到分离的效果(√)(5)凝胶用沸水浴法不但节约时间，而且除去凝胶中可能带有的微生物，排除胶粒内的空气(√)(6)色谱柱的装填时尽量紧密，减小颗粒间隙，无气泡，洗脱液不能断流(√)(7)色谱柱成功的标志：红色区带均匀一致地移动(√)2．红细胞中含有大量的血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是( )A．血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定的顺序进行B．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液C．粗分离中透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质D．可经 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定解析：选 B 蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。提取和分离血红蛋白时，首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品处理；再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去，即样品纯化，纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后，配制成凝胶悬浮液，而不是用生理盐水；最后经 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。1．常用的蛋白质分离方法(1)凝胶色谱法 蛋白质项目 相对分子质量大相对分子质量小凝胶内部不能进入能进入运动方式垂直向下垂直向下和无规则扩散运动经过路程较短较长洗脱次序先流出后流出(2)电泳法原理① 在一定 pH 下，蛋白质分子...
