植物总D NA 得提取一、所需仪器设备及消耗品剪刀、塑料袋(封口)、冰箱、棕色广口瓶(1000、5 0 0、20 0、1 00、50m l)、量筒(1000、5 0 0、1 0 0、10ml)、烧杯(1000、50 0、200、100ml)、pH试纸、电子天平、高压灭菌锅、研钵、液氮罐(液氮)、水浴锅、离心机、移液器(1 套)、枪头(1ml、2 0 0 m l、2 0 μl)、枪头盒、离心管(1、5ml)(包括盒与架)、一次性手套、电泳仪、电泳槽、塑料胶带(宽)、微波炉、凝胶成像系统、垃圾桶、冰盒(自制)、记号笔、单面刀片二、所需化学药品及试剂CTAB、N aCl、E DT A-N a 2·2 H 2O、T r is、冰乙酸、硼酸、β—巯基乙醇、NaAc、氯仿(三氯甲烷)、异戊醇、无水乙醇、溴酚蓝、琼脂糖、蔗糖、溴化乙锭(EB)、R N ase、N aOH、HCl(浓)、d dH2O三、各种缓冲液得配制(一)2%CTA B 提取缓冲液(300ml)(高压灭菌)4 mol/L 得Na Cl 3 5 ml×3=1 05ml1m ol/L 得 Tris—H Cl 10 ml×3=30ml0、5mo l/L得E DTA 4ml×3=12 mlC T A B 2 g×3=6 g(二)1×T E(母液pH 8、0)(5 0ml)(高压灭菌)1mol/L 得 Tris-H C l(pH8、0) 500μl0、5mo l/L得 EDTA(p H 8、0) 1 0 0 μl最后加d d H 2O 定容到 5 0ml工作液为 0、1×T E(4 5m l 灭菌得 ddH2O 中,加入 5m l已灭菌得 1×TE)(三)4 m o l/L得 NaCl(1 5 0m l)(高压灭菌) 35
055g 得 NaC l,加d dH2O120ml 溶解,再加水定容到15 0m l(四)1m o l/L