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DNA提取各种缓冲液的配制

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植物总D NA 得提取一、所需仪器设备及消耗品剪刀、塑料袋(封口)、冰箱、棕色广口瓶(1000、5 0 0、20 0、1 00、50m l)、量筒(1000、5 0 0、1 0 0、10ml)、烧杯(1000、50 0、200、100ml)、pH试纸、电子天平、高压灭菌锅、研钵、液氮罐(液氮)、水浴锅、离心机、移液器(1 套)、枪头(1ml、2 0 0 m l、2 0 μl)、枪头盒、离心管(1、5ml)(包括盒与架)、一次性手套、电泳仪、电泳槽、塑料胶带(宽)、微波炉、凝胶成像系统、垃圾桶、冰盒(自制)、记号笔、单面刀片二、所需化学药品及试剂CTAB、N aCl、E DT A-N a 2·2 H 2O、T r is、冰乙酸、硼酸、β—巯基乙醇、NaAc、氯仿(三氯甲烷)、异戊醇、无水乙醇、溴酚蓝、琼脂糖、蔗糖、溴化乙锭(EB)、R N ase、N aOH、HCl(浓)、d dH2O三、各种缓冲液得配制(一)2%CTA B 提取缓冲液(300ml)(高压灭菌)4 mol/L 得Na Cl 3 5 ml×3=1 05ml1m ol/L 得 Tris—H Cl 10 ml×3=30ml0、5mo l/L得E DTA 4ml×3=12 mlC T A B 2 g×3=6 g(二)1×T E(母液pH 8、0)(5 0ml)(高压灭菌)1mol/L 得 Tris-H C l(pH8、0) 500μl0、5mo l/L得 EDTA(p H 8、0) 1 0 0 μl最后加d d H 2O 定容到 5 0ml工作液为 0、1×T E(4 5m l 灭菌得 ddH2O 中,加入 5m l已灭菌得 1×TE)(三)4 m o l/L得 NaCl(1 5 0m l)(高压灭菌) 35.055g 得 NaC l,加d dH2O120ml 溶解,再加水定容到15 0m l(四)1m o l/L 得N aC l(40 0 μl)(用于配制 RNas e储存液) 取 4mol/L 得Na C l(已灭菌)100μl,加 300μl 灭菌得d dH2O。(五)3m ol/L 得 Na A c 溶液(pH5、2)(50 ml)(高压灭菌)NaAc·3 H2O 20。40 5g加 ddH2O 30ml用冰乙酸调节 pH 至 5、2加dd H2O 定容到 50ml(六)RNase 储存液(1 0m g/ml)(1m l)1mol/L得 Tris—HCl(p H7、5) 10μ l1 m o l/L得 NaCl 1 5 μlRN as e 10mg沸水浴1 5~2 0 m i n(七)EB 储存液(1mg/ml)E B 3 0m gddH2O 30ml磁力搅拌至完全溶解,装入棕色瓶,铝箔包裹,保存于室温。制胶时E B 终浓度为 0、5μ g/ml(30 m l 加 15μ l、40 ml加 20μl)(八)10×T BE 缓冲液(电泳...

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