“通督启神”法电针对 AD 小鼠海马区小胶质细胞及 TLR4 通路的影响1 目的和意义阿尔茨海默病(AD)是最常见的神经退行性疾病,对当今老龄化社会人类健康产生了巨大的威胁,给社会带来了沉重的经济负担。AD 主要由淀粉样蛋白 β(Aβ)沉积,异常的 Tau 蛋白磷酸化和脑内神经免疫炎性反应等原因引起。大量讨论显示,在传统中医理论指导下,电针疗法在改善阿尔茨海默病患者临床症状和在 AD 模型动物实验讨论中均显现出一定的优势,本讨论采纳“通督启神”法指导下的不同电针(脉冲电针和音乐电针)以及不同电针结合多奈哌齐对 7 月龄 APPswe/PS1δE9 转基因小鼠进行干预,旨在探讨其对于 AD 模型小鼠的行为学作用差异,并从小胶质细胞活化以及 TLR4 通路角度探讨其发挥作用的可能机制。2 讨论方法 7 月龄 APPswe/PS1δE9 小鼠 60 只随机分为 6 组,每组 10 只,分别为:AD 模型组(M 组)、药物组(D 组)、脉冲电针组(DZ 组)、脉冲电针合药物组(DZ+D 组)、音乐电针组(YZ 组)及音乐电针合药物组(YZ+D 组)。以 7 月龄相同遗传背景的雄性 C57BL6 小鼠 10 只为正常对比组(N 组)。N 组:其他组干预时抓取一次,固定于自制鼠套,不做其他处理,1 次/天;M 组:同 N 组;D组:多奈哌齐溶液按体重以 0.92mg/kg 标准灌胃,然后固定于自制鼠套,1 次/天;DZ 组:将小鼠固定于自制鼠套,选取小鼠百会穴(GV20)、印堂穴(GV29)、水沟穴(GV26),其中百会向上、印堂穴向下平刺进针,进针深度为 0.3cm,脉冲电针正极连接百会穴处针柄,负极连接印堂处针柄,选择疏密波,电流强度 0.1mA,频率 2/50Hz,脉冲电针干预结束,取无菌针灸针快速点刺小鼠水沟穴,不留针不连接电针;DZ+D 组:每天行脉冲电针干预,方法同 DZ 组,灌胃给药方法同 D 组,连续15 天;YZ 组:取穴、针刺方法同 DZ 组,将音乐电针两级连接小鼠百会、印堂穴处针柄,选择“痴呆”音乐治疗处方,强度以小鼠头部轻轻颤抖为标准;YZ+D 组:每天行音乐电针干预,方法同 YZ 组,灌胃给药方法同 D 组。以上干预,20 min/次,1 次/天,共计 15 天。15 天干预结束后,将各组小鼠放于 Morris 水迷宫恒温游泳池中进行可视平台实验,随后开始进行为期 5 天的隐蔽平台实验和在隐蔽平台实验,结束后 24 小时内进行的定位航行实验。采纳 HE 染色方法观察各组小鼠海马区齿状回组织结构和病理变化;利用免疫组织化学法标记海马区小胶质细胞表面受体 Iba1 观察小胶质细胞活化数量;采纳免疫荧光双标...
