细菌鉴定中常用的生理生化反应生命科学学院 生 02 孙禹 2025012376实验日期：2025-4-9 同组姓名：张宇成、冯佳界一、实验目的1、了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常用的生理生化反应的测定方法2、通过不同细菌对不同含碳、含氮化合物的分解利用情况了解细菌碳、氮代谢类型的多样性3、了解细菌在培育基中的生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义4、学习各种接种技术二、实验原理各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。细菌的这种代谢特点可供鉴别细菌之用。用生理生化实验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。本次实验中所用方法及原理如下：（一）糖类发酵实验糖分解实验是鉴别微生物是常用的生理生化反应。绝大多是细菌都能利用糖类作为碳源和能源。但是各种细菌对所具有的相应酶系统 不尽相同，对不同糖类的利用能力和方式也存在差异。例如有些细菌能发酵葡萄糖，而不能分解乳糖；有些会产生有机酸或气体。在培育基中预先加入溴甲酚紫，当发酵产酸时，培育基由紫色变为黄色；气体产生可以由杜氏小管来证明。（二）甲基红(Methyl Red)（M.R.实验）甲基红实验是用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。当产生酸性物质时，培育基在加入甲基红之后呈红色；若酸性较弱或者没有产酸，则呈黄色。有些细菌(如大肠杆菌等)分解糖类产生丙酮酸，丙酮酸进一步反应形成甲酸、乙酸、乳酸等，使培育基的 pH 降低到 4.2 以下。 有些细菌(如产气杆菌)在培育的早期产生有机酸，但在后期将有机酸转化为非酸性末端产物，如乙醇、丙酮酸等，使 pH 升至大约 6。（三）V.P.试验(伏―普试验)V.P.实验是用来测定某些细菌以用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力。某些细菌分解葡萄糖生成丙酮酸，再将丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在碱性条件下，被氧化为二乙酰，二乙酰与培育基中所含胍基作用，生成红色化合物，即为 V.P.阳性。（四）靛基质(吲哚)实验某些细菌，如大肠杆菌，能产生色氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸，产生靛基质(吲哚)，靛基质与对二甲基氨基苯甲醛结合，形成玫瑰色靛基质(红色化合物)。（五）硫化氢实验某些细菌能分解含硫的氨基酸（胱氨酸、半胱氨酸），产生硫化氢，硫化氢与培育基中的铁盐反应，形成黑色的硫化铁沉淀，为硫化氢实验阳性。（六）明胶液化实验蛋白质和氨基酸一般作...
