新乡医学院分析化学实验课教案首页 授课老师姓名及职称：一、实验名称维生素 B12的吸收曲线绘制及注射液的含量测定二、授课对象药学授课形式实验教学三、教学目标1．掌握分光光度计的使用方法2．掌握注射剂含量的测定和计算方法3．熟悉测绘吸收曲线的一般方法四、教学内容1．吸收曲线的绘制方法2．应用吸光系数法测定注射剂含量及计算方法3．752 型紫外－可见分光光度计的使用方法五、教学安排与课时分配1．讲解演示 40 min2．学生操作 老师辅导 120min六、授课重点1．吸收曲线的绘制方法2．752 型紫外－可见分光光度计的使用方法七、注意事项1．752 型分光光度计光源的使用 2．每次改变波长，需重新调 T 为“0”3．B12应避光八、授课方法老师示范讲述，学生操作九、使用教材《分析化学实验》自编教材十、教研室审查意见主任签字新乡医学院化学教研室 年 月 日实验 维生素 B12的吸收曲线绘制及注射液的含量测定一、实验目的1. 掌握分光光度计的使用方法；2。 掌握注射剂含量的测定和计算方法;3。 熟悉测绘吸收曲线的一般方法。二、实验原理维生素B12是含Co的有机化合物，其注射液为粉红色至红色的澄明液体。要测定B12注射液的含量，可以用紫外－可见分光光度法测定,用此法进行含量测定，必须知道B12的λmax，λmax可以通过绘制吸收曲线来得到.吸收曲线:将不同波长的单色光依次通过被分析的物质，分别测得不同波长下的吸光度，以波长为横坐标,以吸光度为纵坐标所描绘的曲线。吸光度最大时对应的波长为λmax,在λmax处测吸光度。B12在278,361，550nm处有最大吸收，在λmax处测得A，根据吸光系数法可以求出注射液中B12的含量。吸光系数法:A=Ecl实验中要求测361nm处的A，相应的吸光系数为207。三、仪器与试剂752型紫外－可见分光光度计，10mL容量瓶，5mL吸量管;0。1g·L—1维生素B12水溶液，维生素B12注射液(市售品)。四、实验步骤1．752型分光光度计的使用（1）开启电源开关，使仪器预热20分钟。（2）用波长选择旋钮设置所需的分析波长。（3）将装参比溶液的比色皿置于光路，打开样品室盖,调节T旋钮，使显示器指针指在“0.00％”。（4）将装参比溶液的比色皿置于光路，关闭样品室盖，调节A旋钮，使显示器指针指在“100.00％"。（5) 重复操作(3)和（4），直至仪器显示稳定。（6）将装参比溶液的比色皿置于光路，关闭样品室盖，进行测定，在显示器上读出A。（7）仪器使用完毕，关闭电源，拔下电源插头。取出比色皿，洗净、晾干.复...
